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毛細(xì)管電泳儀的注意事項(xiàng)

閱讀:1064      發(fā)布時(shí)間:2023-12-15
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毛細(xì)管電泳儀以彈性石英毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力,依據(jù)樣品中各組分的淌度(單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的遷移速度)和分配行為的差異而實(shí)現(xiàn)各組分分離。
 
工作原理
 
毛細(xì)管電泳柱中裝載電解液運(yùn)行時(shí),由于管壁硅羥基的存在會(huì)產(chǎn)生電滲流,電滲流將推動(dòng)整個(gè)毛細(xì)管柱內(nèi)的溶液定向移動(dòng)。與一般色譜技術(shù)的主要區(qū)別在于其分離原理不是基于組分在流動(dòng)相和固定相中分配系數(shù),而是在電場(chǎng)作用下離子遷移速度的不同。
 
注意事項(xiàng)
 
1、進(jìn)樣系統(tǒng):其較常用的方式主要為流體動(dòng)力學(xué)進(jìn)樣和電遷移進(jìn)樣,該進(jìn)樣系統(tǒng)結(jié)構(gòu)包括動(dòng)力和計(jì)時(shí)控制部件、毛細(xì)管和樣品瓶及緩沖液瓶的位置變換控制部件等。
 
2、毛細(xì)管清洗裝置和緩沖液填充系統(tǒng):酸堿活化毛細(xì)管可保證CE分離結(jié)果,此外,填充緩沖液也是必須的步驟之一。一般毛細(xì)管清洗或緩沖液填灌采用正壓或負(fù)壓來(lái)實(shí)現(xiàn),要求系統(tǒng)具有一定的密閉性。商品化的儀器通常將毛細(xì)管清洗過(guò)程與進(jìn)樣過(guò)程共享壓力控制機(jī)構(gòu),但計(jì)時(shí)以分鐘為單位,對(duì)進(jìn)樣精度有所影響。
 
3、毛細(xì)管及其溫控系統(tǒng):CE分析實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,焦耳熱效應(yīng)降低分離效率且在一定程度上影響分析結(jié)果的重復(fù)性。因此需要設(shè)計(jì)一個(gè)溫度可調(diào)的恒溫環(huán)境來(lái)降低焦耳熱效應(yīng)同時(shí)規(guī)避外界溫度變化對(duì)毛細(xì)管分離結(jié)果造成的影響。風(fēng)冷和液冷兩種溫控方式較為常用。風(fēng)冷控溫是通過(guò)控制空氣對(duì)流實(shí)現(xiàn)但效果不佳。液冷控溫是將毛細(xì)管置于恒溫液體中,一般以水為冷卻介質(zhì),由專門的制冷系統(tǒng)進(jìn)行冷卻或恒溫并經(jīng)由流路進(jìn)行循環(huán)。其效果良好,故為常用的溫控方式。
 
4、檢測(cè)系統(tǒng):CE應(yīng)用紫外檢測(cè)器最為廣泛,其采用柱上檢測(cè)方式,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作方便,使用前需在適當(dāng)位置將毛細(xì)管外壁涂層的彈性保護(hù)層聚酰亞胺膜剝離,讓透明部分對(duì)準(zhǔn)光路??赏ㄟ^(guò)灼燒、硫酸腐蝕或者刀片刮除等方式實(shí)現(xiàn)涂層剝離。

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