產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
出售二手不銹鋼層析柱層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,從而分離的一種層析法。
層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關(guān),但由于軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞,一般不超過1米。分族分離時(shí)用短柱,一般凝膠柱長20-30厘米,柱高與直徑的比較5:1─10:1,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。 分級(jí)分離時(shí)柱高與直徑之線為20:1─100:1,常用凝膠柱有50×25厘米,10×25厘米。層析柱濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,如果支掌濾板下的死體積大,被分離組分之間重新混合的可能性就大,其結(jié)果是影響洗脫峰形,出現(xiàn)拖尾出象,降低分辯力。在精確分離時(shí),死體積不能超過總床體積的1/1000
以中壓柱層析法提取分離冬凌草甲素為例:
1.吸附劑的處理及柱子裝填
將一定量薄層層析硅膠裝人搪瓷盤置于烘箱中,于105。C活化2H后,取出放置室溫即可裝柱。柱子采用干法填充,填滿整個(gè)柱體,不留死體積,密封后用柱塞式計(jì)量溶劑泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵人溶劑,至溶劑流出止。
2.上樣
將冬凌草的乙醇提取物400G用適量丙酮溶解,泵人中壓柱柱頭,然后泵人石油醚1000RID。
3.洗脫
出售二手不銹鋼層析柱以一定比例的石油醚一丙酮為洗脫液,60ML/MIN的流速進(jìn)行梯度洗脫,柱的使用壓力為2~ 3KG/C 。按每份500ML收集,TLC檢識(shí)展開劑(2:8),顯色劑5%香草醛濃硫酸乙醇液
至洗脫*,相同流份合并,回收溶劑。將冬凌草甲素流份合并蒸干。加人適量甲醇熱溶后自然放置,析出結(jié)晶,為冬凌草甲素。
4.層析柱再生、平衡
有效成分經(jīng)TLC檢識(shí)全部流出后,用純丙酮5000ML再生,丙酮一