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技術(shù)文章

液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀分析動(dòng)物源食品中 30 種鎮(zhèn)靜劑的殘留量

閱讀:78          發(fā)布時(shí)間:2024-11-20

摘要本文介紹了一種結(jié)合使用 Captiva EMR-Lipid 與 6495 LC-MS/MS,簡單、高效地檢測多種動(dòng)物源基質(zhì)中 30 種鎮(zhèn)靜劑殘留量的方法。在 0.1–200 ng/mL 的濃度范圍內(nèi),所檢測的 30 種鎮(zhèn)靜劑的相關(guān)系數(shù)均高于 0.99,表明該方法具有良好的線性。在豬肉、牛肉、羊肉、雞肉、豬肝和牛奶基質(zhì)中方法定量限為 1 μg/kg,檢測限為 0.5 μg/kg,在豬腎基質(zhì)中,方法定量限為 2 μg/kg,檢出限為 1 μg/kg。在加標(biāo)濃度為 1–10 μg/kg 時(shí),除亞砜的回收率在不同基質(zhì)中差異較大外,其余化合物的平均加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在 60.8%–119.6% 和 0.5%–9.9% 之間,準(zhǔn)確度和精密度良好。


前言鎮(zhèn)靜劑類藥物通過抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)活動(dòng)而達(dá)到鎮(zhèn)靜的作用,可用于精神治療,并在畜禽生產(chǎn)中用于動(dòng)物高密度養(yǎng)殖、長途運(yùn)輸?shù)?,以促進(jìn)動(dòng)物生長或緩解運(yùn)輸應(yīng)激[1]。然而,此類藥物的濫用會(huì)導(dǎo)致藥物殘留在動(dòng)物體內(nèi)并發(fā)生蓄積,通過食物鏈進(jìn)入人體后,可能對(duì)人體健康產(chǎn)生一系列不良副作用。GB 31650-2019[2]規(guī)定,僅允許使用治療劑量,但在動(dòng)物源性食品中不得檢出;2020 年,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第 250 號(hào)公告《食品動(dòng)物中禁止使用的藥品及其他化合物清單》[3] 中明確禁止使用?,F(xiàn)行有效的動(dòng)物源性食品中鎮(zhèn)靜劑類藥物殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)[4-5] 涉及的藥物種類仍不夠全面,且前處理方法復(fù)雜繁瑣。本應(yīng)用選擇30 種常用的鎮(zhèn)靜劑藥物,使用 Captiva EMR-Lipid 高效去脂并結(jié)合高靈敏度 6495 LC-MS/MS,建立了一種準(zhǔn)確、高效地同時(shí)檢測多種動(dòng)物源基質(zhì)中的鎮(zhèn)靜劑類藥物殘留的方法。


實(shí)驗(yàn)部分試劑和樣品標(biāo)準(zhǔn)品: 標(biāo)準(zhǔn)品和溶液配制分別取適量標(biāo)準(zhǔn)品,用甲醇分別配制得到濃度為 1 mg/mL 的單標(biāo)儲(chǔ)備液;然后取適量單標(biāo)儲(chǔ)備液,用甲醇稀釋為 10 μg/mL 的混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作液,儲(chǔ)藏于 -20 °C 冰箱中備用?;|(zhì)校準(zhǔn)標(biāo)樣的配制:分別準(zhǔn)確移取上述適量混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作液,使用空白基質(zhì)溶液稀釋為濃度分別為 0.1(豬腎基質(zhì)為 0.2)、0.5、1、5、50、100、200 ng/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后上機(jī)檢測。


樣品前處理稱取基質(zhì)樣品,加入甲酸乙腈提?。唤?jīng)鹽析分層后,取上清液加一定量水,過 Captiva EMR-Lipid 凈化除脂;然后使用 AgilentPoroshell 120 EC-C18 色譜柱結(jié)合 6495 LC-MS/MS 進(jìn)行測定。圖 1 顯示了詳細(xì)的樣品前處理操作流程。

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質(zhì)譜條件質(zhì)譜: Agilent 6495 三重四極桿質(zhì)譜系統(tǒng)離子源模式:ESI (+)干燥氣溫度:250 °C干燥氣流速:11 L/min鞘氣溫度: 400 °C鞘氣流速: 12 L/min霧化氣壓力:35 psi毛細(xì)管電壓:3500 (+)掃描模式: MRM(具體參數(shù)見表 1)


結(jié)果與討論標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性以空白基質(zhì)提取液為稀釋溶劑,以目標(biāo)物定量離子的響應(yīng)為縱坐標(biāo),以上述基質(zhì)校準(zhǔn)標(biāo)樣濃度為橫坐標(biāo),繪制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線。各目標(biāo)物的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)(以牛肉舉例)見表 2。從表中可以看出,在 0.1–200 ng/mL 的濃度范圍內(nèi),以外標(biāo)法定量,牛肉基質(zhì)中所有目標(biāo)化合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)均大于 0.99,表明該方法具有良好的線性。

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