聯系電話
上海瑋馳儀器有限公司
中級會員·5年
- 聯系人：
- 蘇小姐
- 電話：
- 400-820-3556
- 手機：
- 18521301252
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)環(huán)科路999弄浦東國際人才港13號樓2樓
掃一掃訪問手機商鋪
浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院血液科白血病團隊金潔教授、張儀老師與美國希望之城國家醫(yī)學中心的學者們在Journal of Hematology & Oncology（IF=29.5）雜志在線發(fā)表了題為“IL1RAP-specific T cell Engager Depletes Acute Myeloid Leukemia Stem Cells"的研究論文，介紹了自主研發(fā)的IL1RAP-特異性T細胞銜接抗體（TCE），BIF002，能夠在有效清除急性髓系白血?。ˋML）白血病干細胞（LSCs）的臨床前研究。研究中利用Beacon®單細胞光導系統作為IL1RAP特異性抗體的發(fā)現工具。
研究背景
目前認為白血病干細胞（LSCs）的持續(xù)存在是急性髓性白血?。ˋML）患者治療失敗的主要原因之一。LSCs具有無限自我更新的能力，且對治療表現出強烈的抵抗性。由于缺乏特異性抗原來區(qū)分LSCs和正常造血干細胞（HSCs），靶向和消除LSCs一直是一項挑戰(zhàn)。研究發(fā)現，白細胞介素-1受體輔助蛋白（IL1RAP）在AML細胞和LSCs上高度表達，而在HSCs上則沒有表達。這一發(fā)現為靶向和消除AML細胞，同時又保護正常造血功能提供了新的可能性。
BIF002抗體發(fā)現和抗體設計
為開發(fā)抗人IL1RAP的抗體以用于白血病免疫治療，研究者使用重組人IL1RAP的細胞外域（ECD）對Balb/c小鼠進行免疫。從免疫小鼠的脾臟中收集CD138+ B細胞，利用Beacon®單細胞光導系統篩選能夠分泌特異性結合IL1RAP抗體的單B細胞，通過單個細胞RT-PCR，最終成功分離出34對抗人IL1RAP的抗體的VH/VL序列，并基于CDR的序列多樣性選擇了十二個單克隆抗體（mAb）候選。這十二個VH/VL序列隨后被克隆到含有人類恒定域的載體中，創(chuàng)建了鼠-人嵌合抗IL1RAP抗體。研究者對這些候選單克隆抗體（mAbs）進行了多種特征分析，最終選定了活性且IL1RAP-24 mAbs。
利用Fab臂交換技術（FAE），研究者將IL1RAP-24 mAbs及另一個自主研發(fā)的人源化CD3抗體（靶向T細胞），進一步轉化成IL1RAP x CD3 TCE。通過在抗體的Fc段引入突變，來消除其與FcγR的非特異性結合，從而獲得了BIF002 TCE抗體。此外，研究者還在BIF002的IL1RAP和CD3 Fab中分別引入突變，設計了CD3臂功能失活的BIF018（具有IL1RAP識別功能，但無T細胞引導能力），以及IL1RAP和CD3雙臂功能失活的BIF026（同時缺乏IL1RAP識別和T細胞引導能力）作為陰性對照抗體。
圖1. IL1RAP-24單克隆抗體的特性分析及抗IL1RAP/CD3雙特異性T細胞銜接器（TCE）的生產
主要研究結果
在體外實驗中，BIF002顯示出對AML細胞的強效殺傷作用，這種作用依賴于BIF002的劑量以及效應細胞與靶細胞的比率。令人鼓舞的是，即使在低劑量下，BIF002也能實現接近100%的腫瘤細胞裂解，并且其IC50值通常低于納摩爾水平，與IL1RAP的表達水平呈負相關。更重要的是，BIF002對正常CD34+骨髓細胞表現出較低的毒性，不影響其克隆形成能力，這表明BIF002在殺傷AML細胞的同時，能夠保護正常的造血干細胞功能。
圖2. BIF002誘導IL1RAP劑量依賴性的T細胞激活、細胞因子釋放和T細胞增殖。
在體內模型中，BIF002聯合T細胞治療顯著降低了腫瘤負荷并延長了小鼠的生存期。特別是在患者源性異種移植（PDX）模型中，使用10 µg劑量的BIF002能夠顯著提高小鼠的總生存期。此外，通過二次移植實驗，研究者進一步證實了BIF002對白血病干細胞（LSCs）具有顯著的清除作用，接受T細胞+BIF002治療的小鼠在外周血中未檢測到白血病細胞，并且在未進行進一步治療的情況下存活超過200天。相比之下，接受對照治療的小鼠則迅速死于AML。這些結果進一步說明BIF002作為一種有前景的AML治療候選藥物的價值。
圖3. BIF002在AML PDX模型中進行二次移植的體內療效。
研究結論
研究者的結果證明了BIF002具有強大的抗白血病活性，能夠選擇性地引導T細胞殺死AML中的腫瘤細胞和LSCs，且沒有明顯的血液學或非血液學毒性。這些結果尚屬初步，目前研究團隊正在進行新藥臨床試驗申請（IND）所需的研究，包括藥代動力學和藥效學（PK/PD）以及其他的毒理學研究，以便迅速將這一有前景的T細胞銜接抗體從實驗室轉化到臨床。
單克隆抗體不僅可以單獨成藥，新型的雙特異性抗體、抗體偶聯藥物、抗體融合蛋白等藥物的開發(fā)均為基于具有特異性結合的功能抗體的進一步改造。Beacon®單細胞光導系統為越來越多科學家們針對新靶點和新型抗體療法的開發(fā)提供簡便快捷的單克隆抗體發(fā)現工具。
