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Simoa® 文獻(xiàn) | Extracellular Vesicles (EV)應(yīng)用方向最新文獻(xiàn)分享

2024-5-27  閱讀(84)

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自2016年起,Simoa®在細(xì)胞外囊泡領(lǐng)域共有50余篇文獻(xiàn)發(fā)表。本次,Quanterix團(tuán)隊(duì)為您整理了其中6篇發(fā)表于2024年的文獻(xiàn)供您參考閱讀。

第1篇

Measuring EGFr on extracellular vesicles in human plasma samples


幾乎所有類型的細(xì)胞均會(huì)分泌細(xì)胞外囊泡(EV)到胞外,起到細(xì)胞間通訊的關(guān)鍵作用,并已成為疾病進(jìn)展的有價(jià)值的指標(biāo)。它們?cè)诎┌Y診斷和監(jiān)測(cè)方面的潛力尤其重要。表皮生長(zhǎng)因子受體 (EGFr) 是多種癌癥的主要驅(qū)動(dòng)因素,也是癌癥治療的重要靶點(diǎn)或共同靶點(diǎn)。本研究的目的是開發(fā)一種直接在血漿樣本中測(cè)量 EV 上 EGFr 的測(cè)定方法。此外還開發(fā)了三種測(cè)定法來測(cè)量血漿 EV 的總濃度。


由于EV 上預(yù)期的 EGFr 濃度較低,采用單分子陣列 (Simoa®) 技術(shù)開發(fā)了免疫測(cè)定法,與傳統(tǒng)免疫測(cè)定方法相比,該技術(shù)的靈敏度提高了 1000 倍。使用市售的校準(zhǔn)材料和針對(duì)表面標(biāo)記物(EGFr、CD9、CD63 和 CD81)的抗體開發(fā)四種測(cè)定法:CD81-EGFr、CD81-CD9、CD81-CD63 和 CD9-CD63。來自健康個(gè)體 (n=13) 和各種癌癥患者 (n=30,肺癌、結(jié)直腸癌、卵巢癌) 的小群體血漿樣本用于開發(fā)、驗(yàn)證和測(cè)試。文章對(duì)每種測(cè)定方法均針對(duì) EV 的稀釋線性、檢測(cè)限、分析變異和分析前穩(wěn)定性進(jìn)行了測(cè)試。與健康個(gè)體(中位數(shù):663×106 EV EGFr/mL)相比,癌癥患者 EV 上的 EGFr 較低(中位數(shù):489 × 106 EV EGFr/mL)。相反,與健康個(gè)體相比,癌癥患者血漿中的總 EV 濃度明顯較高(CD81-CD9:9157 vs 4088,CD81-CD63:3634 vs 1582,CD9-CD63:9538 vs 1210,中位值 x106 EV/mL)。總 EV 測(cè)定之間觀察到正相關(guān)(r=0.6,p<0.0001)。本研究所開發(fā)的檢測(cè)方法可以測(cè)量人血漿樣本中 EV 上的 EGFr 和總 EV,與健康個(gè)體相比,癌癥患者的 EV 總濃度大幅增加。這些檢測(cè)現(xiàn)已準(zhǔn)備好使用大量癌癥樣本進(jìn)行全面驗(yàn)證。



第2篇

Specific binding of Alzheimer’s Aβ

peptides to extracellular vesicles


阿爾茨海默病 (AD) 是 65 歲及以上成年人的第五大死因,但人們對(duì)這種疾病的發(fā)病和進(jìn)展知之甚少。淀粉樣蛋白(Aβ42)的存在決定了人們何時(shí)處于AD連續(xù)體。有趣的是,隨著AD的進(jìn)展,血漿中可檢測(cè)到的 Aβ42 減少,這種現(xiàn)象被認(rèn)為是由Aβ在大腦中聚集得更多,并且通過CSF從大腦轉(zhuǎn)運(yùn)到血液導(dǎo)致。我們認(rèn)為細(xì)胞外囊泡(EV)在這種運(yùn)輸中發(fā)揮作用。 EV存在于血液、尿液和腦脊液等體液中,并攜帶多種生物活性分子“貨物"(例如蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)、代謝物),動(dòng)態(tài)反映分泌EV的細(xì)胞的變化。


在這項(xiàng)工作中,為了確定 Aβ42 和 Aβ40 淀粉樣肽是否EV特異性結(jié)合,我們首先對(duì)血漿分離的囊泡進(jìn)行了表征,以確認(rèn)它們是 EV。在確認(rèn)我們從血漿中分離出EV后,我們將它們與Aβ42或Aβ40一起孵育,然后使用單分子陣列 (SIMOA®) 對(duì)其進(jìn)行分析。為了確定Aβ肽和EV之間相互作用的分子特異性和熱力學(xué)性質(zhì),我們通過等溫滴定量熱法 (ITC) 和 SIMO分析了Aβ肽和具有相同氨基酸組成但隨機(jī)序列的肽的結(jié)合。在基于滴定的方法中使用ITC揭示Aβ40或Aβ42與EV的飽和結(jié)合,并且 SIMOA® 測(cè)量證實(shí)。結(jié)果表明,Aβ與EV的相互作用比之前理解的更特異,這表明Aβ和EV相互作用在正常和病理?xiàng)l件下(如 AD)下都具有生理作用,并且這種與 EV 相關(guān)的淀粉樣蛋白具有作為 EV 相關(guān)淀粉樣蛋白的AD生物標(biāo)志物的潛在效用。


第3篇

Comparison of plasma soluble and extracellular vesicles-associated 2 biomarkers in Alzheimer's Disease patients and

cognitively normal individuals


β 淀粉樣蛋白 (Aβ) 和 tau 蛋白是阿爾茨海默病 (AD) 的大腦標(biāo)志,也作為可溶性生物標(biāo)志物存在于血液中或封裝在細(xì)胞外囊泡 (EV) 中。我們的目標(biāo)是評(píng)估 AD 病理學(xué)的可溶性血漿生物標(biāo)志物與 EV 的數(shù)量和含量的相關(guān)性。


方法:Simoa®測(cè)定對(duì)一組APOE ε4– 和APOE ε4+ 認(rèn)知正常個(gè)體 (CN) 和 AD 患者的血漿樣本和神經(jīng)源性 EV (NDEV) 中的Aβ42/40和tau 進(jìn)行定量。

結(jié)果:與CN個(gè)體相比,AD患者的可溶性血漿 Aβ42/40比率降低。各組之間血漿NDEV的數(shù)量和含量(Aβ40、Aβ42、tau)相似。僅在CN個(gè)體中,可溶性生物標(biāo)志物的數(shù)量與NDEV數(shù)量呈負(fù)相關(guān)。


結(jié)論:可溶性 Aβ42/40比率是最穩(wěn)健的AD血漿生物標(biāo)志物。 NDEV及其內(nèi)容物的分析指出了AD中 Aβ釋放的特殊機(jī)制。


第4篇

Endo-lysosomal dysfunction in neurodegenerative diseases: opinion on current progress and future direction in the use of exosomes as biomarkers


在過去的二十年中,越來越多的研究強(qiáng)調(diào)了內(nèi)體運(yùn)輸缺陷與神經(jīng)變性之間的聯(lián)系。內(nèi)溶酶體網(wǎng)絡(luò)是一個(gè)重要、復(fù)雜的細(xì)胞系統(tǒng),專門負(fù)責(zé)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和其他代謝物的運(yùn)輸,對(duì)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。該通路的破壞與多種神經(jīng)退行性疾病有關(guān),包括阿爾茨海默病、帕金森病、肌側(cè)索硬化癥、亨廷頓病和額顳葉癡呆。此外,有強(qiáng)有力的證據(jù)表明該途徑的缺陷為診斷和治療干預(yù)創(chuàng)造了機(jī)會(huì)。在這篇評(píng)論文章中,我們簡(jiǎn)要闡述了內(nèi)溶酶體功能障礙在五種神經(jīng)退行性疾病中的作用,并討論了未來的研究如何研究這種細(xì)胞內(nèi)途徑,包括細(xì)胞外囊泡,特別關(guān)注外泌體,以鑒定新的疾病生物標(biāo)志物。本文是“了解神經(jīng)變性中的內(nèi)溶酶體網(wǎng)絡(luò)"討論會(huì)議的一部分。


第5篇

Exosome subpopulations: the isolation and the functions in diseases


外泌體是細(xì)胞分泌的納米級(jí)細(xì)胞外囊泡。外泌體通過釋放其生物活性內(nèi)容物(例如 DNA、RNA、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和代謝物)來介導(dǎo)細(xì)胞間通訊。外泌體的成分受外泌體產(chǎn)生細(xì)胞的調(diào)節(jié)。由于其來源不同,外泌體在大小、內(nèi)容和功能上具有高度異質(zhì)性。根據(jù)這些特征,外泌體可以分為具有不同功能的多個(gè)亞群。外泌體特定亞群的有效富集有助于研究其生物學(xué)功能。因此,已經(jīng)開發(fā)了多種技術(shù)來分離外泌體的特定亞群。在本綜述中系統(tǒng)介紹了分離不同外泌體亞群的新興新技術(shù),并總結(jié)了特定外泌體亞群在疾病,特別是腫瘤發(fā)生和進(jìn)展中的關(guān)鍵作用。


第6篇

Ultrasensitive and high-resolution protein spatially decoding framework for tumor

extracellular vesicles


位于腫瘤來源的細(xì)胞外囊泡 (EV) 表面或管腔內(nèi)的蛋白質(zhì)在癌癥進(jìn)展中發(fā)揮著作用。然而,由于現(xiàn)有蛋白質(zhì)檢測(cè)方法的靈敏度有限和EV分離技術(shù)效率低下,EV內(nèi)蛋白質(zhì)定量受到了阻礙。在這項(xiàng)研究中,提出了 eSimoa 框架,這是一種創(chuàng)新方法,能夠以靈敏度和特異性對(duì)EV蛋白生物標(biāo)志物進(jìn)行空間解碼。使用此法,可以釋放并測(cè)量RAS或KRAS G12D 蛋白的絕對(duì)濃度,揭示它們?cè)谝认倌[瘤來源的EV中的普遍性,實(shí)現(xiàn)了低豐度 EV 亞群的絕對(duì)蛋白質(zhì)濃度定量檢測(cè)。 eSimoa 檢測(cè) PBS 和血漿樣本中的EV,證實(shí)了它們?cè)诓煌R床樣本類型中的適用性??傮w而言,eSimoa 框架提供了一個(gè)有價(jià)值的工具,可以 (1) 檢測(cè)血漿中濃度低至 105 EV /mL的EV,(2) 量化低至 fM 的絕對(duì)EV蛋白濃度,以及 (3) 解碼EV蛋白。這項(xiàng)研究強(qiáng)調(diào)了eSimoa在以最少的預(yù)純化方式識(shí)別臨床樣本中疾病特異性 EV 蛋白生物標(biāo)志物方面的潛力,從而推動(dòng)臨床轉(zhuǎn)化的進(jìn)步。


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