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熒光素酶報告基因在檢測GLP-1RA(胰高血糖素樣肽-1受體激動劑)藥物活性中起到了關鍵作用。以下是其應用原理:
首先,熒光素酶報告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(firefly luciferase)活性的一種報告系統(tǒng)。當熒光素酶與熒光素底物反應時,會發(fā)出生物熒光,這種熒光信號的強度與熒光素酶的活性成正比。
在GLP-1RA藥物活性檢測中,熒光素酶報告基因系統(tǒng)通常與GLP-1受體(GLP-1R)的報告基因質(zhì)粒結合使用。這種質(zhì)粒包含了與GLP-1R基因表達相關的啟動子序列,使得當GLP-1R被激活時,可以驅(qū)動熒光素酶基因的表達。
具體檢測步驟如下:
1,將GLP-1R的報告基因質(zhì)粒與熒光素酶報告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染到適當?shù)募毎抵?,?93細胞。
2,將待測的GLP-1RA藥物添加到細胞培養(yǎng)基中,使其與細胞上的GLP-1R結合并激活。
3,如果GLP-1RA藥物能夠成功激活GLP-1R,那么與GLP-1R基因表達相關的啟動子序列就會被激活,進而驅(qū)動熒光素酶基因的表達。
4,通過添加熒光素底物并測量產(chǎn)生的熒光信號強度,可以評估GLP-1RA藥物的活性。熒光信號的強度反映了熒光素酶的活性,進而反映了GLP-1R的激活程度。
這種方法具有高靈敏度、高特異性和操作簡便等優(yōu)點,使得研究人員能夠更準確地評估GLP-1RA藥物的活性和藥效。熒光素酶報告基因在檢測GLP-1RA藥物活性中發(fā)揮著重要作用,為藥物研發(fā)和藥效評估提供了有力的工具。
CHASELECTION逐典螢光素酶報告基因檢測試劑盒旨在準確、靈敏、高效地測定螢火蟲螢光素酶活性,應用高通量藥物篩選、藥物活性檢測、大規(guī)模啟動子功能測定、信號通路等研究。
逐典螢光素酶報告基因
針對報告基因檢測不同的側重需求,逐典推出了3種檢測系統(tǒng)。
逐典螢光素酶報告基因優(yōu)勢:
1. 檢測靈敏度高,信號穩(wěn)定性好
HEK293-NFK B-LUC細胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時后,分別用增強型、超敏型、穩(wěn)定型檢測試劑進行信號檢測。
2. 操作方便
僅需將底物和螢光素酶檢測緩沖液混合后直接加入到細胞即可。
3. 穩(wěn)定性好
同時在10次反復凍融實驗中,逐典全系列報告基因檢測試劑盒顯示出較強的穩(wěn)定性。