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Revvity小動物活體光學(xué)成像技術(shù)已在生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、臨床前醫(yī)學(xué)研究及藥物 研發(fā)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。在眾多應(yīng)用領(lǐng)域中，皮膚創(chuàng)傷是近年來活體光學(xué)成像技術(shù)的 應(yīng)用熱點之一。小動物光學(xué)成像技術(shù)可對燒傷領(lǐng)域的研究起到重要的作用，促進(jìn)該領(lǐng)域 研究的進(jìn)展。利用小動物光學(xué)成像技術(shù)可以研究1、皮膚創(chuàng)傷發(fā)生后愈合的機制；2、創(chuàng) 傷伴隨的細(xì)菌感染的發(fā)生和進(jìn)展及機體自身產(chǎn)生的免疫反應(yīng)；4、治療性的干細(xì)胞、藥 物等在體內(nèi)的靶向、分布、代謝等。下面結(jié)合一些具體實例進(jìn)行闡述：

在包括燒傷在內(nèi)的皮膚創(chuàng)傷研究中首先通過光學(xué)成像系統(tǒng)可觀察皮膚受到燒傷 等創(chuàng)傷后疾病發(fā)展或愈合的機制。例如Judith Campisi 和他的同事證明，在皮膚創(chuàng)傷 中，衰老細(xì)胞起到積極的作用，通過分泌血小板衍生生長因子(PDGF-AA)來促進(jìn)傷口 的愈合。在研究中研究人員建立了一種轉(zhuǎn)基因小鼠模型使得衰老細(xì)胞在體內(nèi)可視化 (The p16-3MR 小鼠模型，即將包含功海參熒光素酶，單節(jié)顯性 RFP，以及縮短的單 純皰疹病毒（HSV-1）胸腺激酶（HSV-TK）的 3MR 融合蛋白構(gòu)建入小鼠 P16IKN4a 基因的啟動子下，而P16IKN4a在大部分衰老的細(xì)胞表達(dá)，因此可顯示衰老細(xì)胞)；利 用該小鼠模型可觀察皮膚創(chuàng)傷后衰老細(xì)胞在創(chuàng)傷部位匯集如下圖所示，進(jìn)而可研究衰 老細(xì)胞參與皮膚愈合的機制。

上圖.檢測轉(zhuǎn)基因小鼠的特點。A.對照或X射線照射（IR）的 p16-3MR 小鼠，連續(xù)5天腹腔注射PBS 或 25 mg/kg of GCV，在注射底物腔腸素后進(jìn)行成像，可以看到正常的p16-3MR 小鼠未檢測到發(fā)光的信號， 而經(jīng)X射線誘導(dǎo)衰老后，P16-3MR 開始表達(dá)，而 GCV（丙氧鳥苷）對細(xì)胞有殺傷作用。B.小鼠皮膚創(chuàng) 傷后，腹腔注射底物腔腸素進(jìn)行成像和定量分析，提示在兩天后檢測到發(fā)光的信號，在第6天時達(dá)到峰 值。H.P16-3MR 小鼠傷口的圖像。Marco Demaria,et al.Developmental Cell 2014,31: 722–733.

在大面積燒傷或其他皮膚創(chuàng)傷發(fā)生時，往往伴隨感染，而感染也成為燒傷患者致 死的重要原因。利用小動物光學(xué)成像系統(tǒng)，可無創(chuàng)的實時檢測燒傷引起的感染程度， 分析細(xì)菌在傷口的生長，對感染程度作出判斷，同樣也可以檢測體內(nèi)免疫系統(tǒng)對感染 的反應(yīng)，研究機體抵御感染的作用機制。例如Min-Ho Kim就利用小動物光學(xué)成像系 統(tǒng)檢測了小鼠皮膚創(chuàng)傷時嗜中性粒細(xì)胞在傷口的分布及金黃色葡萄球菌在創(chuàng)口的增 值情況。在研究中，Min-Ho Kim 利用增強型綠色熒光蛋白標(biāo)記嗜中性粒細(xì)胞的轉(zhuǎn)基 因小鼠（lys-EGFP mice）和熒光素酶標(biāo)記的金黃色葡萄球菌，分別利用熒光和生物發(fā) 光成像即可檢測在小鼠體內(nèi)嗜中性粒細(xì)胞和金黃色葡萄球菌的時空分布。

上圖.上：嗜中性粒細(xì)胞在傷口愈合過程中對傷口的浸潤；下：粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子和金黃色葡萄 球菌注射后增加系統(tǒng)嗜中性粒細(xì)胞的量和在傷口的分布，但是并未增加傷口的愈合時間，圖中生物發(fā)光顯 示金黃色葡萄球菌的分布，熒光成像顯示嗜中性粒細(xì)胞的時空分布。 Min-Ho Kim,et al.Journal of Investigative Dermatology (2008), 128:1812-1822

同樣利用小動物光學(xué)成像系統(tǒng)可以對燒傷等皮膚創(chuàng)傷的治療方法進(jìn)行評價，如評 價治療性干細(xì)胞或相關(guān)藥物的分布靶向及代謝情況，從而對治療機制和效果做出準(zhǔn)確 的判斷。其中ElkeSeppanen就利用IVIS光學(xué)成像技術(shù)觀察了皮膚發(fā)生創(chuàng)傷時，分泌 膠原蛋白的胎兒微嵌合體細(xì)胞（fetal microchimeric cells，F(xiàn)MC）在創(chuàng)傷部位的分布， 并證明了在創(chuàng)傷發(fā)生后分泌膠原蛋白的細(xì)胞對創(chuàng)口的治療作用，從而研究干細(xì)胞的治 療效果及存進(jìn)傷口愈合的機制（如下圖所示）。并且Revvity的 IVIS 成像技術(shù)在藥物 研發(fā)中應(yīng)用已經(jīng)非常成熟，全球各大制藥企業(yè)均已采用活體光學(xué)成像技術(shù)開展多種新 藥的研發(fā)，其中已有6種藥物獲得FDA認(rèn)證，另有8種藥物處于臨床測試階段。另外 ，Revvity的 IVIS 光學(xué)成像系統(tǒng)是受FDA認(rèn)可的系統(tǒng)。

上圖.上排：小鼠I型膠原a2（col1a2）微嵌合模型的建立。(A)繁殖策略，野生型雌性小鼠與半合子col1a2 轉(zhuǎn) 基因雄性小鼠（該小鼠在表達(dá)col1a2細(xì)胞中表達(dá)熒光素酶）交配，此方式可得到50% 的后代和因懷孕獲得 的表達(dá)熒光素酶基因的胎兒微嵌合體細(xì)胞（FMC）即實驗組；野生型雌性，即與野生型的雄性進(jìn)行交 配作為對照。 (B) 創(chuàng)傷模型：在產(chǎn)后大出血的雌性小鼠身上建立背部切割創(chuàng)傷，在創(chuàng)傷后0到7天連續(xù)進(jìn)行 生物發(fā)光成像。下排：產(chǎn)生膠原的FMC在傷口起始的第一天就被招募到母體皮膚創(chuàng)口處。

此外在燒傷或其他皮膚創(chuàng)傷發(fā)生后，損傷組織立即發(fā)生變性、滲出等一系列反應(yīng)， 同時產(chǎn)生炎癥反應(yīng)和血管內(nèi)皮細(xì)胞損害，燒傷后的炎癥反應(yīng)屬于急性炎癥反應(yīng)。利用 Revvity的熒光探針即可檢測燒傷發(fā)生或愈合過程中，炎癥的發(fā)生和發(fā)展。

Revvity除提供專業(yè)的成像設(shè)備外，還具備專業(yè)的生物學(xué)研發(fā)團隊，在生物學(xué)模型建立及 應(yīng)用方面提供強大支持。生物發(fā)光方面，幾十種穩(wěn)定的生物發(fā)光腫瘤細(xì)胞株，生物發(fā)光 細(xì)菌菌株，以及優(yōu)質(zhì)的生物發(fā)光底物熒光素；熒光成像方面，具有幾十種功能性熒光試 劑（包括酶激活類、特異靶向類、血管生理類），可滿足癌癥、炎癥、心血管疾病、代謝 疾病、傳染病等多種領(lǐng)域的應(yīng)用需求，方便研究者直接開展上述實驗；另外，還提供多 種有機熒光染料及納米顆粒類熒光探針，用于細(xì)胞、蛋白、抗體等對象的標(biāo)記成像。這些 生物學(xué)產(chǎn)品可以很大程度的提高研究效率，加快發(fā)表高水平文章的進(jìn)程。