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Trypelectase 重組胰蛋白酶是逐典生物專門為疫苗、病毒載體生產(chǎn)設(shè)計(jì)，具有高效、非動(dòng)物源和高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特點(diǎn)。該胰蛋白酶氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶一致，由大腸桿菌(E.col) 重組表達(dá)生產(chǎn)。在GMP級(jí)別環(huán)境中生產(chǎn)的重組胰蛋白酶能高效消化貼壁細(xì)胞且不造成傷害，產(chǎn)品質(zhì)量滿足藥典要求。

一，在醫(yī)藥開發(fā)、生化研究領(lǐng)域中的應(yīng)用

在生化研究方面，重組胰蛋白酶可分析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、氨基酸序列；

在醫(yī)藥領(lǐng)域，由于重組胰蛋白酶會(huì)選擇性水解賴氨酸、精氨酸肽鏈，因此可用于治療各種炎癥、潰瘍、癬疥、水腫、血腫等疾病，并能夠促進(jìn)抗生素等藥物向病灶滲透。重組胰蛋白酶制劑主要是注射用胰蛋白酶，可用于外科炎癥、肺氣腫、支氣管炎、創(chuàng)傷性損傷、毒蛇咬傷等治療領(lǐng)域。

二，在疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用

疫苗是目前預(yù)防疾病發(fā)生和傳播最為有效的方式，主流生產(chǎn)疫苗的主要方法有：雞胚培養(yǎng)系統(tǒng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)。

目前使用最為廣泛的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，動(dòng)物細(xì)胞在適宜環(huán)境下能夠迅速增殖，并且由于其與人體組織細(xì)胞極為相似，故而其生產(chǎn)的疫苗具有很高的免疫原性。傳統(tǒng)的雞胚培養(yǎng)疫苗系統(tǒng)則存在許多不足之處，比如培養(yǎng)的病毒容易發(fā)生變異;與人群流行病毒株存在差異導(dǎo)致疫苗效果不佳或無預(yù)防效果;病毒大范圍傳播時(shí)健康雞胚供應(yīng)受限致使短時(shí)間內(nèi)無法滿足對(duì)疫苗的需求。

1、用于疫苗生產(chǎn)中細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的細(xì)胞解離

貼壁依賴型動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)都是貼附于固相表面進(jìn)行生長，一般貼附于培養(yǎng)器皿表面或微載體，我們稱之為貼壁培養(yǎng)。在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，需要使用細(xì)胞消化液對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行處理，使之成為單個(gè)細(xì)胞并且不對(duì)其造成損傷，其中酶類細(xì)胞消化液主要成分為蛋白水解酶和緩沖保護(hù)溶液。

當(dāng)前市場上所售以重組胰蛋白酶消化液為主，重組胰蛋白酶能夠水解細(xì)胞間的沾粘蛋白，釋放出單個(gè)獨(dú)立細(xì)胞，并且很好的保持細(xì)胞的完整性和細(xì)胞活性。

2、用于疫苗生產(chǎn)中裂解病毒

以細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)的流感病毒血凝素HA為例：流感病毒血凝素HA被宿主蛋白酶裂解為成熟的HA1和HA2后才能夠介導(dǎo)病毒囊膜與靶細(xì)胞融合，開始病毒生命周期，因此HA的裂解成為病毒感染細(xì)胞的首要因素，因此可以采用外加重組胰蛋白酶的方式進(jìn)行裂解，以進(jìn)行病毒疫苗的生產(chǎn)，其可有效的提高病毒產(chǎn)量，從而進(jìn)行大規(guī)模的生產(chǎn)并簡化相關(guān)生產(chǎn)工藝。

3、用于消除疫苗生產(chǎn)過程中可能造成的生物危害

當(dāng)前基因工程疫苗是國際社會(huì)生物安全管理的一個(gè)集中點(diǎn)，在基因工程疫苗的研制過程中，經(jīng)過基因重組而攜帶外源基因的生物體一旦逃逸到環(huán)境中，經(jīng)過基因整合后，可能會(huì)引起生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，打破其在長期進(jìn)化過程中所形成的生態(tài)平衡，威脅自然界中的生物，有些病毒具有導(dǎo)致靶組織損傷的基因，可能使原本無害的微生物變得極其危險(xiǎn)。

三，逐典重組胰蛋白酶特點(diǎn)

1.GMP級(jí)生產(chǎn)環(huán)境、符合藥典標(biāo)準(zhǔn)

2.重組生產(chǎn)、不含雜酶

3.批量生產(chǎn)、質(zhì)量穩(wěn)定

4.高純度、高比活

5.非動(dòng)物源原料

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

CT26.WT 和 HEK293FT 細(xì)胞消化實(shí)驗(yàn)

CT26WT和HEK293FT在經(jīng)Trypelectase重組胰酶消化3min后解離效果較好，細(xì)胞活率顯示對(duì)細(xì)胞傷害較小，不會(huì)影響細(xì)胞傳代。

Trypelectase重組豬胰酶對(duì)細(xì)胞消化過程及傳代24h細(xì)胞貼壁圖