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細(xì)胞治療工藝流程優(yōu)化案例

IsoPlexis 單細(xì)胞功能蛋白質(zhì)組技術(shù)將單細(xì)胞技術(shù)和功能性蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)合起來采用的微流控微室反應(yīng)和抗體條碼技術(shù)在單細(xì)胞水平對分泌的多種細(xì)胞因子和胞內(nèi)磷酸化蛋白組等在活細(xì)胞狀態(tài)下進(jìn)行高靈敏多重檢測分析，對功能蛋白進(jìn)行定性、定量，以此洞察單細(xì)胞功能異質(zhì)性。

通過簡單易用的生信分析軟件對單細(xì)胞數(shù)據(jù)進(jìn)行自動(dòng)分析，得到具有指導(dǎo)性的結(jié)果，幫助下一步?jīng)Q策。

IsoPlexis助力Iovance TIL 工藝優(yōu)化

發(fā)表成果：Iovance Generation-2 Tumor-infiltrating lymphocyte product is reinvigorated during the manufacturing process, ESMO virtual conference, 2020

研究目的：過繼細(xì)胞療法是一種可以逆轉(zhuǎn)內(nèi)源性 TIL 功能障礙的治療策略，其過程涉及將 T 細(xì)胞從免疫抑制性 TME 中遷移出來， 在體外顯著擴(kuò)增 TIL，同時(shí)使其恢復(fù)活力，并將細(xì)胞重新注入患者體內(nèi)。為了確定使用 Iovance 的第 2 代擴(kuò)增方案 （D22 TIL） 生成的 TIL 是否導(dǎo)致 TIL 群體重新煥活，相對于內(nèi)源性 TIL （D0），評估了 D0 和 D22 TIL 的表型、功能和腫瘤反應(yīng)性。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：使用 FACS 對從消化的腫瘤活檢中分離的內(nèi)源性 CD3+ TIL （D0） 進(jìn)行分選，并與使用 Iovance 的 Gen 2 工藝 （D22） 擴(kuò)增 22 天的 TIL 進(jìn)行比較。來自黑色素瘤、宮頸癌和頭頸部鱗狀細(xì)胞癌的 7 對 D0 和 D22 TIL 的 T 細(xì)胞亞群通過 FACS 評估表型和調(diào)節(jié)標(biāo)志物，通過體外激活評估功能，通過自體腫瘤共培養(yǎng)評估腫瘤反應(yīng)性。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在經(jīng)過IOVANCE第二代TIL擴(kuò)增培養(yǎng)22天后，TIL中CD4和CD8的多功能性和PSI指數(shù)顯著升高。說明Iovance 的第二 代（Gen2）TIL 擴(kuò)增方案從多功能細(xì)胞角度能夠與T細(xì)胞有效激活。結(jié)論：IsoCode單細(xì)胞分泌蛋白組芯片提供對于TIL細(xì)胞治療產(chǎn)品工藝變更后的有效評估。

評估生產(chǎn)中攪拌式培養(yǎng)對于T細(xì)胞功能影響

發(fā)表文章：Enabling Allogeneic T Cell-Based Therapies: Scalable Stirred-Tank Bioreactor Mediated Manufacturing, Front. Med. Technol. ( 2020, IF=9.927)

研究目的：細(xì)胞療法的臨床需求要求 T 細(xì)胞活化和擴(kuò)增技術(shù)具備有效性和可放大性。然而，新技術(shù)的聯(lián)合使用可能會對治療效 果產(chǎn)生意想不到的影響。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：在這項(xiàng)研究中Lonza 通過比較攪拌式培養(yǎng)前后的細(xì)胞，研究了攪拌式生物反應(yīng)器對細(xì)胞多功能性的影響。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：結(jié)果顯示，經(jīng)攪拌式培養(yǎng) 14 天后，同時(shí)分泌 7 種或更多細(xì)胞因子的 CD4 和 CD8 細(xì)胞顯著增加，其中許多細(xì)胞分 泌了效應(yīng)、刺激性、趨化、調(diào)節(jié)性和炎癥等功能的細(xì)胞因子組合。

結(jié)論：在決定是否采用新的制造和生物工藝技術(shù)時(shí)，這些詳細(xì)的功能信息可以幫助驗(yàn)證細(xì)胞功能。