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什么是報告基因?
報告基因( reporter gene) 是一種編碼在內(nèi)源蛋白背景下易被檢測出來的蛋白質(zhì)或酶的基因。報告基因與目的基因或調(diào)控序列相連,通過間接或直接檢測報告基因編碼產(chǎn)物的信號,比如報告蛋白、mRNA、酶等,直觀反映細胞內(nèi)基因的轉(zhuǎn)錄活性或表達水平。一般報告基因的特點是無毒、無免疫原性、易于檢測、具有一定的特異性。報告基因編碼產(chǎn)物的半衰期是比較關(guān)注的一個關(guān)鍵點。編碼產(chǎn)物半衰期和報告基因的應(yīng)用領(lǐng)域息息相關(guān)。
那么報告基因該如何選擇呢?在選擇報告基因時一般基于以下幾個原則:對宿主的影響,內(nèi)源性活性影響以及方法是否成熟等。
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報告基因的種類及優(yōu)勢
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熒光素酶報告基因
在生物醫(yī)藥行業(yè)最主要的報告基因為熒光素酶報告基因。最常見的熒光素酶 (luciferase)基因來源于螢火蟲。螢火蟲螢光素酶在ATP、氧氣和Mg2+存在條件下,催化螢光素的氧化羧化,釋放出光信號,這是任何已知生物發(fā)光系統(tǒng)中效率較高的發(fā)光反應(yīng),因而被設(shè)計用來檢測和定量哺乳動物細胞中螢火蟲螢光素酶的表達。相對于其他報告基因,螢光素酶具有諸多優(yōu)勢:檢測靈敏度高,型號穩(wěn)定性好,操作方便。
CHASELECTION逐典螢光素酶報告基因檢測試劑盒旨在準確、靈敏、高效地測定螢火蟲螢光素酶活性,應(yīng)用高通量藥物篩選、藥物活性檢測、大規(guī)模啟動子功能測定、信號通路等研究。
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逐典螢光素酶報告基因
針對報告基因檢測不同的側(cè)重需求,逐典推出了3種檢測系統(tǒng)。
一 增強型螢光素酶報告基因檢測試劑盒
均衡時間與發(fā)光強度,適應(yīng)各種應(yīng)用場景
高通量和超高通量檢測的選擇
二 超敏型螢光素酶報告基因檢測試劑盒
提供超高強度發(fā)光,讓檢測結(jié)果更直觀
適合自動化連續(xù)處理樣品
三 穩(wěn)定型螢光素酶報告基因檢測試劑盒
提供持續(xù)發(fā)光,為檢測爭取更多時間
半衰期更長,光信號更穩(wěn)定
批檢測理想選擇
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逐典螢光素酶報告基因優(yōu)勢
1. 檢測靈敏度高,信號穩(wěn)定性好
HEK293-NFK B-LUC細胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時后,分別用增強型、超敏型、穩(wěn)定型檢測試劑進行信號檢測。
2. 操作方便
僅需將底物和螢光素酶檢測緩沖液混合后直接加入到細胞即可。
3. 穩(wěn)定性好
同時在10次反復(fù)凍融實驗中,逐典全系列報告基因檢測試劑盒顯示出較強的穩(wěn)定性。