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一、體外生物發(fā)光檢測
1. 將細胞鋪在 24 孔黑孔板上,鋪板密度為 0.5-2.0×105 個細胞/孔,37℃,培養(yǎng)過夜。
2. 用超純水配制 15 mg/mL 的 D-螢光素儲存液 (100×)。
注:D-螢光素溶液最好現(xiàn)用現(xiàn)配,也可分裝后-20℃ 避光凍存,有效期 1 個月。
3.用預(yù)熱好的細胞培養(yǎng)基 1: 100 稀釋儲存液,配制終濃度 150 μg/mL 的 D-螢光素工作液 (1×)。
4. 去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基直至無殘留。
5.向細胞內(nèi)添加 1×D-螢光素工作液后,立即進行圖像分析。
二、小鼠活體成像檢測
1.用無菌的 DPBS (no Mg2+、Ca2+) 配制 15 mg/mL 的 D-螢光素溶液,0.2 μm 濾膜過濾除菌。
注:D-螢光素溶液最好現(xiàn)用現(xiàn)配,也可分裝后 -20℃ 避光凍存,有效期 1 個月。
2. 按 150 mg/kg 劑量和 10 μL/g 注射體積向每支小鼠注射相應(yīng)量的 15 mg/mL D-螢光素溶液。
3.腹腔或靜脈注射 5-15 min 后進行活體成像分析。