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螢光素酶在ATP、Mg2+和O2的條件下催化D-螢光素鉀鹽進行氧化脫羧反應，發(fā)出平均波長為560nm的藍綠色熒光。當螢光素鉀鹽過
量時，產(chǎn)生的光量子數(shù)與螢光素酶的濃度呈正相關性。由于其方便檢測、定量準確、在生物技術領域有著非常廣泛的應用，特別是體內(nèi)活體成
像領域和報告基因技術領域。
二，D-螢光素鉀鹽的使用方法
1. 溶液的制備
D-熒光素鉀鹽的溶液可以用于染色、標記、檢測等多種應用。
制備D-熒光素鉀鹽溶液的方法：
a.首先稱取適量的D-熒光素鉀鹽，加入適量的去離子水中后進行均勻攪拌；
b.使用過濾膜將溶液過濾，除菌。
c.將D-熒光素鉀鹽溶液調(diào)節(jié)至所需要的濃度。
2. 染色實驗過程
D-熒光素鉀鹽可以用于細胞染色、組織染色等染色實驗，實驗方法如下：
a.首先將細胞或組織樣本固定在載玻片上。
b.然后加入適量的D-熒光素鉀鹽溶液，使試劑溶液可以覆蓋樣本。
c.在黑暗條件下可以孵育一段時間，使D-熒光素鉀鹽充分滲透入細胞或組織中。
d.使用PBS緩沖液洗滌樣本，去除多余的D-熒光素鉀鹽。
e.在顯微鏡下觀察樣本，觀察樣品的熒光信號。
3. 實驗標記
D-熒光素鉀鹽也可以用于標記蛋白質(zhì)、核酸等生物分子。
實驗標記方法：
a.首先將蛋白質(zhì)或核酸與d-熒光素鉀鹽共同孵育。
b.再用凝膠電泳等方法分離標記后的生物分子。
c.最后在熒光顯微鏡下觀察標記后的生物分子即可。
4. 檢測方法
D-熒光素鉀鹽可用于檢測生物分子的存在和濃度。
D-熒光素鉀鹽檢測方法：
a.將d-熒光素鉀鹽與待檢測的生物分子進行共同孵育。
b.用凝膠電泳等方法分離孵育后的混合物。
c.在熒光顯微鏡下觀察熒光信號，即可判斷生物分子的存在和濃度。
三，逐典D-螢光素鉀鹽優(yōu)勢
1.高純度（HPLC驗證純度≥99%)
2.優(yōu)異的生物發(fā)光性能
3.高溶解度（>40mg/ml)
四，應用場景
D-熒光素鉀鹽在不同領域具有多種應用場景。其中包括蛋白表達研究、抗腫瘤或抗病物研究以及mRNA疫苗開發(fā)等。
蛋白表達研究：將Luc基因插入需要研究的蛋白中，可用于定量目標蛋白在實驗動物體內(nèi)的表達情況。
抗腫瘤或抗病物：在腫瘤細胞或病毒中導入Luc基因，建立腫瘤或病毒感染小鼠模型，注射藥物后，通過活體成像技術觀測腫瘤大小或病毒感染的變化。
mRNA疫苗開發(fā)：在mRNA中插入Luc基因，脂質(zhì)體包裹后注射實驗動物后，可通過活體成像技術可觀測疫苗的免疫效果。
五，應用案例分享
