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日常實(shí)驗(yàn)中,在貼壁細(xì)胞傳代前需要把細(xì)胞用消化試劑從培養(yǎng)容器表面解離出來,細(xì)胞得以分離成單個懸液傳代至含新鮮培養(yǎng)基的新容器內(nèi)。細(xì)胞消化的好,后續(xù)實(shí)驗(yàn)就會進(jìn)行的更加順利;反之,則既浪費(fèi)了時間又出不了成果。在細(xì)胞消化的方法中,酶消化法是常用的方法,使用合適的消化酶則是細(xì)胞消化的關(guān)鍵步驟。
重組胰蛋白酶是一種使用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的酶?,F(xiàn)代生物制藥的生產(chǎn)過程中,使用含有動物源的原料,可能會將引起人畜共患病的潛在病毒源帶入產(chǎn)品中,如瘋牛病的BSE、口蹄疫病毒等,為了減少污染源,通過基因工程技術(shù)合成胰蛋白酶,解決了傳統(tǒng)使用的豬或牛胰蛋白酶可能帶來病毒污染的風(fēng)險。重組胰蛋白酶多用重組大腸桿菌或酵母系統(tǒng)重組表達(dá)并經(jīng)過多步層析純化獲得,重組胰蛋白酶與天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源,能特異性切割多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基。因其無動物源污染性,在醫(yī)藥開發(fā)、生化研究領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。
逐典重組胰蛋白酶是一款滿足藥典要求的GMP級非動物源胰蛋白酶
Trypelectase 重組胰蛋白酶是逐典生物專門為疫苗、病毒載體生產(chǎn)設(shè)計,具有高效、非動物源和高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特點(diǎn)。該胰蛋白酶氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶一致,由大腸桿菌(E.col) 重組表達(dá)生產(chǎn)。在GMP級別環(huán)境中生產(chǎn)的重組胰蛋白酶能高效消化貼壁細(xì)胞且不造成傷害,產(chǎn)品質(zhì)量滿足藥典要求。
逐典重組胰蛋白酶特點(diǎn)
1.GMP級生產(chǎn)環(huán)境、符合藥典標(biāo)準(zhǔn)
2.重組生產(chǎn)、不含雜酶
3.批量生產(chǎn)、質(zhì)量穩(wěn)定
4.高純度、高比活
5.非動物源原料
逐典重組胰蛋白酶應(yīng)用場景
組織塊的消化解離和原代細(xì)胞的獲取、貼壁細(xì)胞的傳代消化和收獲、微載體方法培養(yǎng)的細(xì)胞消化和收獲。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
CT26.WT 和 HEK293FT 細(xì)胞消化實(shí)驗(yàn)
CT26WT和HEK293FT在經(jīng)Trypelectase重組胰酶消化3min后解離效果較好,細(xì)胞活率顯示對細(xì)胞傷害較小,不會影響細(xì)胞傳代。
Trypelectase重組豬胰酶對細(xì)胞消化過程及傳代24h細(xì)胞貼壁圖