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Cy5-NHS| Cy5@SE|146368-14-1 使用方法推薦

 

分子式：C37H43N3O10S2

分子量：753.88

溶解性：溶于水；DMSO

EX激發(fā)波長:646 nm

EM發(fā)射波長:664nm

用途：花菁染料Cy5，常被應(yīng)用于生物分子標(biāo)記，熒光成像及其他熒光生物分析。他們廣泛應(yīng)用于多肽，蛋白，核苷酸等。Cy5染料具有增強(qiáng)熒光結(jié)合后的蛋白質(zhì)。

儲(chǔ)存條件：避光 -20°C避光

供應(yīng)商：陜西新研博美生物科技有限公司

 

使用方法推薦:（僅供參考）

水溶性Cy5 NHS標(biāo)記 (D-ser2)-leucineenkephalin

1. Cy5 NHS 1.0 mg 溶解于400 μL DMSO后，加入到1mL 的玻璃瓶中盛有(D-ser2)-leucine-enkephalin acetate ( 0.75 mg) 的400 μL DMSO溶液。(Dye 和peptide 投料比是 1:1)

2. 然后加入15 μL三乙胺，常溫避光攪拌反應(yīng)混合物過夜。

3. 用HPLC 純化蛋白，使用蛋白C18柱子(25 cm×10 mm)，每次上樣注入2×400 μL，30分鐘梯度洗脫

從0.1% TFA水溶液到MeCN∶H2O(0.1% TFA)=70∶30，流速4mL /min。(對(duì)不同的蛋白選擇不同的合適HPLC梯度流動(dòng)相)

4. 收集適當(dāng)?shù)纳珟Х?，?biāo)記多肽的保留時(shí)間比未標(biāo)記的多肽長。

5. 產(chǎn)品冷凍干燥成粉末或在水溶液中，-20℃避光儲(chǔ)存;必要時(shí)可用質(zhì)譜表征。

6.CyDye標(biāo)記的蛋白穩(wěn)定性取決于蛋白本身。例如標(biāo)記的IgG在4 ℃可避光保存2月;

更長期的保存需加入等體積的甘油-20 ℃避光保存。

F/P計(jì)算：

Cy5 在650 nm 的摩爾吸光系數(shù)為250 000 M-1 cm-1 ，所用蛋白在280 nm處的摩爾吸光系數(shù)為 170000 M-1 cm-1;

Cy5在280nm處的吸收是650nm處的5%。按以下公式計(jì)算F/P值。

[Cy5 dye] = (A650)/250 000

[peptide] =[A280 -(0.05×A650)]/170000

F/P final= [dye]/[peptide]= {0.68×A650}/ {A280 - (0.05×A650)}

 

陜西新研博美生物科技有限公司產(chǎn)品目錄價(jià)格表：

n-琥珀酰亞胺脂dye nhs esters
  cyanine3 nhs ester
  cyanine3.5 nhs ester
  cyanine5 nhs ester
  cyanine5.5 nhs ester
  cyanine7 nhs ester
  cyanine7.5 nhs ester
  sulfo-cyanine3 nhs ester
  sulfo-cyanine5 nhs ester
  sulfo-cyanine5 bis-nhs ester
  sulfo-cyanine7 nhs ester 
 

炔烴 dye alkynes
  cyanine3 alkyne
  cyanine5 alkyne
  cyanine5.5 alkyne
  cyanine7 alkyne
  cyanine7.5 alkyne
  sulfo-cyanine3 alkyne
  sulfo-cyanine5 alkyne
  
  疊氮化物 dye azides
  cyanine3 azide
  cyanine3.5 azide
  cyanine5 azide
  cyanine5.5 azide
  cyanine7 azide
  cyanine7.5 azide
  sulfo-cyanine3 azide
  sulfo-cyanine5 azide
  sulfo-cyanine7 azide
 

馬來酰亞胺 dye maleimides
  cyanine3 maleimide
  cyanine5 maleimide
  cyanine5.5 maleimide
  cyanine7 maleimide
  cyanine7.5 maleimide
  sulfo-cyanine3 maleimide
  sulfo-cyanine5 maleimide
  
  伯胺 primary amine
  cyanine3 amine
  cyanine5 amine
  cyanine5.5 amine
  cyanine7 amine
  cyanine7.5 amine
  sulfo-cyanine5 amine
  sulfo-cyanine7 amine
  
  馬來酰亞胺 dye maleimides
  cyanine3 maleimide
  cyanine5 maleimide
  cyanine7 maleimide
  sulfo-cyanine3 maleimide
  sulfo-cyanine5 maleimide
  
  羧酸 carboxylic acids
  cyanine3 carboxylic acid
  cyanine5 carboxylic acid
  cyanine7 carboxylic acid
  sulfo-cyanine3 carboxylic acid
  sulfo-cyanine5 carboxylic acid
  sulfo-cyanine7 carboxylic acid 
 

 供應(yīng)商：陜西新研博美生物科技有限公司