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1032678-42-4,Cy5 NHS,小鼠活體應(yīng)該能標(biāo)記染料

CY5 NHS ester是用于標(biāo)記多肽、蛋白和寡核苷酸的氨基基團(tuán)的活性染料。在標(biāo)記反應(yīng)中該染料需要少量的有機(jī)共溶劑（如DMF，DMSO）。對(duì)于可溶性蛋白、各種各樣的多肽和寡核苷酸而言，這種染料是非常理想而且成本低廉的。該染料在有機(jī)溶劑對(duì)小分子物質(zhì)的標(biāo)記也是非常有效的。對(duì)于更多的精細(xì)目標(biāo)物，如易降解蛋白，如果DMF或DMSO會(huì)對(duì)其有影響，可以考慮water-soluble Cy5 NHS ester（水溶性Cy5 NHS ester染料），因?yàn)樗鼈儾恍枰袡C(jī)溶劑助溶，而且具有和熒光染料類似的性質(zhì)。

在過去的幾年里，CY5熒光團(tuán)已經(jīng)成為生命科學(xué)研究和診斷領(lǐng)域非常流行的分子標(biāo)記物。這些熒光素的發(fā)射光為紅光，在這個(gè)范圍大多數(shù)CCD檢測器具有大檢測靈敏度，而且是生物物質(zhì)低背景區(qū)。染料的顏色是非常強(qiáng)烈的，因此在凝膠電泳中低至1nmol的量都能被肉眼觀測到。CY5 NHS ester是用于標(biāo)記多肽、蛋白和寡核苷酸的氨基基團(tuán)的活性染料。在標(biāo)記反應(yīng)中該染料需要少量的有機(jī)共溶劑（如DMF，DMSO）（請(qǐng)參照我們的推薦手冊(cè)以獲得更多幫助信息）。對(duì)于可溶性蛋白、各種各樣的多肽和寡核苷酸而言，這種染料是非常理想而且成本低廉的。該染料在有機(jī)溶劑對(duì)小分子物質(zhì)的標(biāo)記也是非常有效的。對(duì)于更多的精細(xì)目標(biāo)物，如易降解蛋白，如果DMF或DMSO會(huì)對(duì)其有影響，可以考慮water-soluble Cy5 NHS ester（水溶性Cy5 NHS ester染料），因?yàn)樗鼈儾恍枰袡C(jī)溶劑助溶，而且具有和熒光染料類似的性質(zhì)。

 CY5熒光團(tuán)可以與很多的儀器如熒光顯微鏡、成像儀、掃描儀、熒光分析儀等相兼容。許多的CY5衍生物——CY5 NHS ester可以替代Alexa Fluor 647和 DyLight 649等活化酯（activated esters）。

一般特性

外觀:	dark blue powder
分子量:	616.19
分子式:	C36H42ClN3O4
CAS number:	1032678-42-4, 350686-88-3
溶解性:	good in polar (DMSO, DMF) and chlorinated (DCM, chlroform) organic solvents, low solubility in water
質(zhì)量控制:	NMR 1H (95%) and 13C, TLC, functional testing
儲(chǔ)存條件:	Storage: 24 months after receival at -20°C in the dark. Transportation: at room temperature for up to 3 weeks. Avoid prolonged exposure to light. Desiccate.

 

光譜特性

大激發(fā)波長, nm:	646
在大激發(fā)波長下的消光系數(shù), Lmol-1cm-1:	250000
大發(fā)生波長, nm:	662
熒光量子產(chǎn)率:	0.2

Cyanine3/5/7-藥物分子或小分子多肽用于小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)步驟如下：

SPF級(jí) BALB/C裸鼠，6～8 周齡, 18～20克, 實(shí)驗(yàn)前24 h 自由進(jìn)食、飲水。

于實(shí)驗(yàn)裸鼠腹腔內(nèi)注射2%戊ba bi妥鈉300μL(215 mg/ kg)麻醉動(dòng)物。將裸鼠俯臥位平放于小動(dòng)物多光譜活體成像系統(tǒng)的記錄暗箱中。

實(shí)驗(yàn)時(shí)將Cy7 或Cy7 標(biāo)記的生物分子或藥物DMSO 稀釋后,于裸鼠尾靜脈注射200μL( 0.5 mg/g) [用量和時(shí)間需要客戶根據(jù)自己的儀器和藥物試劑等條件優(yōu)化] ,每5min 記錄1張動(dòng)物在體內(nèi)發(fā)射熒光的成像圖片,分析熒光藥物的分布情況。對(duì)照鼠不注射藥物，進(jìn)行同時(shí)記錄。記錄結(jié)束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器，進(jìn)行成像。

Cy7 檢測時(shí)激發(fā)波長700～770 nm 帶通 ,發(fā)射波長790 nm 長通。液晶可調(diào)諧濾光片掃描范圍 780～950 nm ,掃描步進(jìn)10 nm。曝光時(shí)間為500 ms。

不同的藥物代謝時(shí)間不一樣，注射入裸鼠體內(nèi)，熒光立即分布全身，然后逐步向膀胱聚集，呈現(xiàn)顯著的腎排泄的特點(diǎn)一般4~6 小時(shí)，快得只有30 分鐘;如果是骨骼等部位靶點(diǎn)的Cy7 標(biāo)記藥物，有客戶反映一周后活體成像系統(tǒng)仍能檢測到熒光成像。

器官切片觀察：將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4 小時(shí)以上，0%，20%，30%PBS 蔗糖依次沉底，20μm 切片，多聚賴氨酸洗過的載玻片貼片，晾干，DAPI 染色。共聚焦顯微鏡觀察，激光器為氦氖 633 nm。

 

其余N-羥基琥珀酰亞胺脂Dye NHS esters產(chǎn)品

Pyrenebutyric acid NHS ester

ROX NHS ester, pure 6- isomer

BDP FL NHS ester

FAM NHS ester

Cyanine3 NHS ester

Cyanine3.5 NHS ester

Cyanine5 NHS ester

Cyanine5.5 NHS ester

Cyanine7 NHS ester

Cyanine7.5 NHS ester

Sulfo-Cyanine3 NHS ester

Sulfo-Cyanine5 NHS ester

sulfo-Cyanine5 bis-NHS ester

Sulfo-Cyanine7 NHS ester

 

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