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　回收不銹鋼二手菌種發(fā)酵罐一、不同生產(chǎn)階段染菌對發(fā)酵的影響

　　1.種子培養(yǎng)期染菌：對整個發(fā)酵過程的危害極大;

　　2.發(fā)酵前期染菌：嚴(yán)重干擾生產(chǎn)菌的生長繁殖;

　　3.發(fā)酵中期染菌：干擾生產(chǎn)菌的代謝，影響產(chǎn)物的生成;

　　4.發(fā)酵后期染菌：影響相對較小。

　　二、造成發(fā)酵罐染菌的可能途徑有哪些

　　菌種培養(yǎng)過程操作不當(dāng);培養(yǎng)基滅菌不*;發(fā)酵設(shè)備(如發(fā)酵罐、管道)密封不嚴(yán);空氣除菌不凈。

　　三、不同發(fā)酵過程相對危害較大的雜菌種類有哪些

　　1.檸檬酸的發(fā)酵，青霉菌;

　　2.谷氨酸的發(fā)酵，噬菌體;

　　3.青霉素的發(fā)酵，細(xì)短產(chǎn)氣桿菌;

　　4.鏈霉素的發(fā)酵，細(xì)短桿菌、假單孢桿菌;

　　5.四環(huán)素的發(fā)酵，雙球菌、芽孢桿菌、莢膜桿菌。

　　四、發(fā)酵異?，F(xiàn)象及染菌原因分析

　　發(fā)酵異?，F(xiàn)象有以下三點：

　　(1)溶解氧的異常變化：當(dāng)雜菌是好氣性微生物時，溶解氧的變化是在較短時間內(nèi)下降，直至接近于零，且在長時間內(nèi)不能回升;當(dāng)雜菌是非好氣性微生物，而生產(chǎn)菌由于受污染而抑制生長，使耗氧量減少，溶解氧升高。

　　(2)排氣的CO2異常變化：如雜菌污染時，糖耗加快，CO2含量含量增加，噬菌體污染后，糖耗減慢，CO2含量減少。因此，可根據(jù)CO2含量的異常變化判斷染菌。

　　(3)其它異?，F(xiàn)象：如菌體生長不良、pH值的異常變化、發(fā)酵過程中泡沫的異常增多、發(fā)酵液的顏色異常變化、代謝產(chǎn)物含量的異常下跌、發(fā)酵周期的異常拖長、發(fā)酵液的粘度異常增加等判斷染菌。

　　發(fā)酵罐染菌原因分析：

　　(1)從染菌的規(guī)模來分析染菌原因

　　大批發(fā)酵罐染菌：空氣系統(tǒng)。部分發(fā)酵罐(或罐組)染菌：前期可能是種子帶雜菌，或滅菌不*，中后期則可能是中間補料系統(tǒng)或油管路系統(tǒng)發(fā)生問題所造成的。個別發(fā)酵罐連續(xù)染菌：設(shè)備問題(如閥門的滲漏或罐體腐蝕磨損)，設(shè)備的腐蝕磨損所引起的染菌會出現(xiàn)每批發(fā)酵的染菌時間向前推移的現(xiàn)象。個別發(fā)酵罐偶然染菌：原因比較復(fù)雜，因為各種染菌途徑都可能引起。

　　(2)從染菌的類型來分析

　　耐熱性芽孢桿菌：死角或滅菌不*。球菌、酵母：可能是從蒸汽的冷凝水或空氣中帶來的。淺綠色菌落(革蘭氏陰性桿菌) ：發(fā)酵罐的冷卻管或夾套滲漏。霉菌：滅菌不*或無菌操作不嚴(yán)格。

　　(3)從染菌的時間來分析

　　發(fā)酵早期染菌、種子帶菌、培養(yǎng)基和設(shè)備滅菌不*、設(shè)備或管道有死角，中后期染菌、中間補料、設(shè)備滲漏、操作不合理

　　回收不銹鋼二手菌種發(fā)酵罐(4)空氣過濾系統(tǒng)方面原因

　　原因分析：進(jìn)風(fēng)口、生產(chǎn)環(huán)境、空氣過濾器

　　染菌特點：空氣過濾系統(tǒng)帶菌會使發(fā)酵罐批批染菌、罐罐染菌，此時就要對空氣過濾系統(tǒng)進(jìn)行無菌樣檢測

　　六、發(fā)酵罐染菌的檢查和判斷

　　無菌試驗方法、顯微鏡檢查法(鏡檢法)、肉湯培養(yǎng)法、平板劃線培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)檢查法

　　七、雜菌污染的挽救及處理

　　(1)種子培養(yǎng)期染菌：應(yīng)經(jīng)滅菌后棄之，并對種子罐、管道等進(jìn)行仔細(xì)檢查和*滅菌。

　　(2)發(fā)酵前期染菌：營養(yǎng)成分消耗不多，應(yīng)迅速重新滅菌;另處，補充必要的營養(yǎng)成分， 重新接種進(jìn)行發(fā)酵。

　　(3)發(fā)酵中、后期染菌：可以加人適當(dāng)?shù)臍⒕鷦┗蚩股匾约罢５陌l(fā)酵液，以抑制雜菌的生長速度;產(chǎn)品的含量若達(dá)一定值，只要明確是染菌也可放罐。

　　(4)發(fā)酵后對設(shè)備的處理：空罐加熱滅菌后至120℃以上、30min后，才能使用。也可用甲醛熏蒸或甲醛溶液浸泡12h以上等方法進(jìn)行處理。