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上海吉至生化科技有限公司
主營產(chǎn)品： 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ （125mg）,IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進(jìn)口 100g |
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上海吉至生化科技有限公司
主營產(chǎn)品： 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ （125mg）,IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進(jìn)口 100g |
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| 參考價(jià) | ￥ 128 |
| 訂貨量 | 1EA |
更新時(shí)間：2024-03-20 09:08:36瀏覽次數(shù)：103
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | AC10873 |
別名:CCK-8 WST-8
英文名稱:CCK-8 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
儲(chǔ)存條件:4℃密封避光保存
單位:瓶
規(guī)格:100T, 500T, 1000T,
Cell Counting Kit-8 簡稱CCK-8 試劑盒，為MTT 法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒?？捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)。
使用說明：一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（測定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí) （測定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí)）1、先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞。2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個(gè)細(xì)胞濃度梯度，一般要做 3-5 個(gè)細(xì)胞濃度梯度，每組 3-6 個(gè)復(fù)孔。3、接種后培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁，然后加 CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時(shí)間后測定 OD 值，制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)（X 軸），OD 值為縱坐標(biāo)（Y 軸）的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量（試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實(shí)驗(yàn)的條件要一致，便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入 CCK-8 后的培養(yǎng)時(shí)間。）
二、細(xì)胞活性檢測
1、在 96 孔板中接種細(xì)胞懸液（100µL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（在 37℃,5% CO2 的條件下）。
2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì)影響 OD 值的讀數(shù)）。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時(shí)。
4、用酶標(biāo)儀測定在 450nm 處的吸光度。
5、如果暫時(shí)不測定 OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。
三、細(xì)胞增值-毒性檢測
1、在 96 孔板中配置 100 µL 的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng) 24 小時(shí)（在 37 ℃，5% CO2 的條件下）。
2、向培養(yǎng)板加入 10µL 不同濃度的待測物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間（例如：6、12、24 或 48 小時(shí)）。
3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì)影響 OD 值的讀數(shù)）。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉藥物影響。
4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時(shí)。
5、用酶標(biāo)儀測定在 450 nm 處的吸光度。
6、如果暫時(shí)不測定 OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。
活力計(jì)算：.
細(xì)胞活力（％）=[A(加藥)－A(空白)]／[ A(0 加藥)－A(空白)]×100
A（加藥）：具有細(xì)胞、CCK-8 溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養(yǎng)基和 CCK-8 溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度
A（0 加藥）：具有細(xì)胞、CCK-8 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力
注意事項(xiàng)： ①建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時(shí)間。
②白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時(shí)間。③當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn) 96 孔板時(shí)，貼壁細(xì)胞的最小接種量至少為 1 ,000 個(gè)/孔 (100 µL 培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低，因此推薦接種量不低于 2,500 個(gè)/孔 ( 100 µL 培養(yǎng)基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的 10% 加入 CCK-8 溶液。 ④如果沒有 450nm 的濾光片，可以使用吸光度在 430-490 nm 之間的濾光片，但是 450nm 檢測靈敏度最高。
⑤培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí)，通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不會(huì)對(duì)檢測造成影響。
注意：
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
超干溶劑，格式試劑，氘代試劑，色譜溶劑，醫(yī)藥中間體，分析對(duì)照品，生化試劑盒，染色液，現(xiàn)貨10000+
色譜甲醇，超干乙醇，超干甲醇，氘代氯仿，氘代DMSO，四三苯基膦鈀，鈀碳催化劑
常規(guī)試劑 TRIS、尿素、巰基乙醇、牛血清白蛋白Ⅴ，4%組織細(xì)胞固定液，TMB單組分顯色液
BCA蛋白濃度測定試劑盒，淋巴細(xì)胞分離液，彩虹蛋白maker，30%Acr/Bis(29:1) ，
葡聚糖凝膠、茉莉酸甲酯、膠原酶，Percoll 細(xì)胞分離液
膠原蛋白1型，II型、纖維素、螯合樹脂、玉米素、PBS緩沖液，TAE，TBE，RIAP裂解液
脫落酸、藍(lán)色葡聚糖2000、tci DPPH、4萬種試劑大量現(xiàn)貨
胎牛血清四季青，1640培養(yǎng)基，DMEM培養(yǎng)基，MS培養(yǎng)基，瓊脂粉
日本同仁 CCK8、潮霉素B 、K1622、蛋白酶K、異硫*酸胍
OXOID 0042胰蛋白胨、0021酵母粉
西班牙瓊脂糖、櫻花包埋劑、封口膜、柯達(dá)膠片、高壓滅局指示膠帶、透析袋規(guī)格全
