上海吉至生化科技有限公司
主營產品: 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ (125mg),IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進口 100g |
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主營產品: 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ (125mg),IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進口 100g |
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參考價 | ¥ 256 |
訂貨量 | 1EA |
更新時間:2024-03-14 14:47:17瀏覽次數:132
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供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | AC13858 |
英文名稱:BCA Protein Assay Kit
儲存條件:BSA附件-20℃,其它試劑RT,有效期1年
單位:盒
規(guī)格:50T, 10*50T,
產品簡介: 堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫藍色的絡合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween不影響檢測結果,但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發(fā)現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明:
一. 微孔酶標儀法
1. 配制工作液:根據標準品和樣品數量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內穩(wěn)定。
2. 稀釋標準品:取10μL BSA標準品用PBS稀釋至100μL(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/mL。將標準品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白標準品孔中,加PBS補足至20μL。
3. 將樣品作適當稀釋(最好多做幾個梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20μL到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時誤差偏大,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分鐘。用酶標儀測定A562nm,根據標準曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時,應注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結果。
二. 分光光度計法 如沒有酶標儀,可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。 步驟如下:
1. 配制工作液: 根據標準品和樣品數量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內穩(wěn)定。
2. 稀釋標準品:取100μL BSA標準品用PBS稀釋至1mL(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/mL。
3. 取八支(或者更多)5mL離心管,標上號,按下表加入試劑。
4.37℃放置15-30分鐘。用分光光度計測562nm處吸光值,根據標準曲線計算出蛋白濃度。
注意事項:
1. 長期不用時,Cu試劑與PBS稀釋液可置于2-8℃保存,如發(fā)現細菌污染則應丟棄。BCA試劑在低溫條件下出現結晶沉淀時,可37℃溫育使其溶解, 不影響使用。
2. 樣品中若含有較多干擾物質時,請采用Bradford蛋白濃度測定試劑盒(AC13856)。
注意:
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
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