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上海吉至生化科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ (125mg),IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進(jìn)口 100g

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AC15785-25gDEAE葡聚糖凝膠A-50
DEAE葡聚糖凝膠A-50
參考價(jià) 1480
訂貨量 1個(gè)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào) AC15785-25g
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市

更新時(shí)間:2022-11-24 13:53:20瀏覽次數(shù):190

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【簡(jiǎn)單介紹】
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 25g
貨號(hào) AC15785
中文名稱:DEAE葡聚糖凝膠A-50
英文名稱:DEAE-Sephadex A-50
保存條件:RT
有效期:4年
別名:17-0180-02
英文名稱:DEAE-Sephadex A-50
儲(chǔ)存條件:RT
外觀(性狀):白色粉末
單位:瓶
規(guī)格:25g, A-50產(chǎn)品簡(jiǎn)介
DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基葡聚糖A-50)為弱堿性陰離子交換劑。用NaOH將CL-型轉(zhuǎn)變?yōu)镺
【詳細(xì)說(shuō)明】
中文名稱:
DEAE葡聚糖凝膠A-50
英文名稱:
DEAE-Sephadex A-50
保存條件:
RT
有效期:4年
別名:17-0180-02
英文名稱:DEAE-Sephadex A-50
儲(chǔ)存條件:RT
外觀(性狀):白色粉末
單位:瓶
規(guī)格:25g, A-50產(chǎn)品簡(jiǎn)介
DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基葡聚糖A-50)為弱堿性陰離子交換劑。用NaOH將CL-型轉(zhuǎn)變?yōu)镺H-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白屬于中性蛋白(等電點(diǎn)為PH6.85-7.5),其余均屬酸性蛋白。在PH7.2-7.4的環(huán)境中,酸性蛋白均被DEAE-Sephadex A-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通過(guò)柱層析γ球蛋白便可在洗脫中先流出,而其他蛋白則被吸附在柱上,從而便可分離獲得純化的IgG。
產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品名稱:DEAE-Sephadex A-50
基質(zhì):Sephadex
顆粒大?。?0-120μm
最大流速:45cm/h
工作pH:2-9
操作溫度:室溫
保存條件:室溫
A-50實(shí)驗(yàn)步驟
1、預(yù)處理稱DEAE-Sephadex A-50(下稱A-50)5克,懸于500ml蒸餾水,1小時(shí)后傾去上層細(xì)粒。
按每克A-50加0.5M NaOH 15ml的比例,將A-50浸泡于0.5M NaOH中,攪勻,靜置30分鐘,裝入布氏漏斗(墊有2層濾紙)中抽濾,并反復(fù)用蒸餾水抽洗至PH呈中性;再以
0.5M HCl同上操作過(guò)程處理,最后以0.5M NaOH再處理一次。處理完后,將A-50浸泡于0.1M,PH 7.4 PB中過(guò)夜。
2、裝柱(1)將層析柱垂直固定于滴定鐵架上,柱底墊一園尼龍紗,出水口接一乳膠或塑料管并關(guān)閉
開(kāi)關(guān)。
(2)將0.1M,PH7.4 PB沿玻璃棒倒入柱中至1/4高度,再倒入經(jīng)預(yù)處理并以同上緩沖液調(diào)
成稀糊狀的A-50。待A-50凝膠沉降2-3cm厚時(shí),啟開(kāi)出水口螺旋夾,控制流速1ml/分鐘,同時(shí)連續(xù)倒入糊狀A(yù)-50凝膠至所需高度。
(3)關(guān)閉出水口,待A-50凝膠沉降后,柱面放一園形濾紙片,以橡皮塞塞緊柱上口,通
過(guò)插入橡皮塞之針頭及所連接的乳膠或塑料管與洗脫液瓶相連接。
3、平衡
啟開(kāi)出水口螺旋夾,控制流速12-14滴/分鐘,使約2倍床體積的洗脫液流出。并以PH計(jì)與電導(dǎo)儀分別測(cè)定洗脫液及流出液之PH值與離子強(qiáng)度是否相同。達(dá)到一致時(shí)關(guān)閉出水口,停止平衡。
4、加樣及洗脫
啟開(kāi)上口橡皮塞及下口螺旋夾,使柱中液體緩慢滴出,當(dāng)柱面液體與柱面相切時(shí),立即關(guān)閉出水口,以毛細(xì)滴管沿柱壁加入樣品(體積應(yīng)<床體積的2%,蛋白濃度以<100mg為宜)。松開(kāi)出水口螺旋夾使柱面樣品緩慢進(jìn)入柱內(nèi),至與柱面相切時(shí),立即關(guān)閉下口,以少量洗脫液洗柱壁2-3次;再放開(kāi)出水口,使洗液進(jìn)入床柱,隨后立即于柱面上加入數(shù)ml洗脫液,緊塞柱上口,使整個(gè)洗脫過(guò)程成一密閉系統(tǒng)。并控制流速12~14滴/分鐘。
5、 收集
開(kāi)始洗脫的同時(shí)就以試管進(jìn)行收集。每管收集3~5ml。共收集10~15管。
6、測(cè)蛋白
以751-G型紫外分光光度計(jì)分別測(cè)定每管OD280nm,與OD260nm,按前述
公式計(jì)算各管蛋白含量。并以O(shè)D280nm為縱座標(biāo),以試管編號(hào)為橫座標(biāo),繪制洗脫曲線。7、合并、濃縮
將洗脫峰的上坡段與下坡段各管收集液分別進(jìn)行合并,以PEG(MW6000)洗縮至所需體積,加入0.02%NaN3防腐劑,于
4℃保存?zhèn)溆谩?br style="box-sizing: border-box; padding: 0px; margin: 0px;"/>8、A-50凝膠的再生
在柱上先以2M NaCl洗柱上的雜蛋白至流出液的OD280nm<0.02,再以蒸餾水洗去柱中鹽。然后按預(yù)處理過(guò)程將A-50再處理一遍即達(dá)再生。近期用時(shí)泡于洗脫緩
沖液中4℃保存;近期不用時(shí),以*洗2次,再置50℃溫箱烘干,裝瓶?jī)?nèi)保存。
(四) 注意事項(xiàng)
1 .柱的選擇:從理論上說(shuō),只要柱足夠長(zhǎng),就得獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同
壓力梯度有關(guān),柱長(zhǎng)增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低。柱的直徑增加,使液體流動(dòng)的不均勻性增加,分辨率明顯下降。
2. 純化過(guò)程必須嚴(yán)格控制脫緩沖液的PH及離子強(qiáng)度。樣品與A-50凝膠必須用洗脫緩沖
液平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
3.所裝的柱床必須表面平整,無(wú)溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。4.洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過(guò)快。
5. 上樣的體積要小,濃度不宜過(guò)高。
6.加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中,嚴(yán)防柱面變干。
  備注:產(chǎn)品信息可能會(huì)有優(yōu)化升級(jí)。請(qǐng)以實(shí)際標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。
注意::
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

超干溶劑,格式試劑,氘代試劑,色譜溶劑,醫(yī)藥中間體,分析對(duì)照品,生化試劑盒,染色液,現(xiàn)貨10000+
色譜甲醇,超干乙醇,超干甲醇,氘代氯仿,氘代DMSO,四三苯基膦鈀,鈀碳催化劑
常規(guī)試劑 TRIS、尿素、巰基乙醇、牛血清白蛋白Ⅴ,4%組織細(xì)胞固定液,TMB單組分顯色液
BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒,淋巴細(xì)胞分離液,彩虹蛋白maker,30%Acr/Bis(29:1) ,
葡聚糖凝膠、茉莉酸甲酯、膠原酶,Percoll 細(xì)胞分離液
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日本同仁 CCK8、潮霉素B 、K1622、蛋白酶K、異硫*酸胍
OXOID 0042胰蛋白胨、0021酵母粉
西班牙瓊脂糖、櫻花包埋劑、封口膜、柯達(dá)膠片、高壓滅局指示膠帶、透析袋規(guī)格全






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