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產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBcellProbe® 微生物細(xì)胞內(nèi)pH值檢測試劑盒采用BBcellProbe® P11胞內(nèi)pH值熒光探針檢測微生物胞內(nèi)pH值的變化。BBcellProbe® P11是pH敏感的熒光染料，其在堿性條件下熒光強(qiáng)更高，反之酸性條件下變低，從而BBcellProbe® P11可被用于監(jiān)測微生物胞內(nèi)pH變化，見圖一。BBcellProbe® P11是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料，產(chǎn)生的熒光物質(zhì)激發(fā)波長為 488 nm，發(fā)射波長為 528 nm，其在不同的pH值條件下發(fā)射的熒光強(qiáng)度不同，從而可以

保存溫度

2-8℃ 避光

注意事項

1.探針長期不用可以-20℃保存。避免反復(fù)凍融。
2.探針A為DMSO溶液，冬季氣溫較低時為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

有效期

6個月

檢測方法

熒光酶標(biāo)儀或光度計或流式細(xì)胞儀

適用樣本

細(xì)菌

產(chǎn)品應(yīng)用

熒光酶標(biāo)儀或光度計或流式細(xì)胞儀

儀器準(zhǔn)備

1.熒光酶標(biāo)儀或光度計或流式細(xì)胞儀
2.離心機(jī)
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒

試劑準(zhǔn)備

1.PBS緩沖液 2.HBSS 3. Nigericin sodium salt（相關(guān)產(chǎn)品BB-94002）（備選，如果需要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線定量測定）

耗材準(zhǔn)備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套,4.熒光檢測專用黑色96孔板

使用注意事項

1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開蓋時液體灑落。使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進(jìn)行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。 2.pH探針為DMSO溶液，冬季氣溫較低時在室溫時為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解，吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。 3.BBcellProbe® P11探針容易受潮，受潮后穩(wěn)定性較差，注意干燥保存。 4.吸取BBcellProbe® P11探針母液時要用干燥的新吸頭，不能使用含水的吸頭。 5.未使用完的BBcellProbe® P11探針母液請擰緊螺旋蓋，避免受潮失效。 6.BBcellProbe® P11探針工作液含水，配制后不可以長期保存，須現(xiàn)配現(xiàn)用。 7.細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

使用方法

1.染色工作液的配制：根據(jù)樣品數(shù)，用探針稀釋液將P11探針進(jìn)行10倍稀釋，然后再用HBSS緩沖液稀釋 BBcellProbe® P11溶液20倍，配制成BBcellProbe® P11染色工作液。 2.將 BBcellProbe® P11染色工作液加入已處理好的細(xì)胞，在37℃孵育60-120 分鐘。 3.用PBS洗滌細(xì)胞2-3次。用PBS重懸細(xì)胞。 4.然后用該細(xì)胞進(jìn)行熒光細(xì)胞內(nèi)pH變化情況檢測。激發(fā)波長 488-506 nm，發(fā)射波長526-536 nm。【注】： ?熒光強(qiáng)度增加則細(xì)胞內(nèi)pH值增加，熒光強(qiáng)度降低則細(xì)胞內(nèi)pH值下降。 ?必須使用熒光檢測專用黑色96孔板。

參考文獻(xiàn)

1. Xingyue Bao et al. Ornithine decarboxylation (ODC) system of Shewanella baltica regulates putrescine production and acid resistance J Food Prot 2020 2. Weitao Su et al. Interaction between PHB2 and Enterovirus A71 VP1 Induces Autophagy and Affects EV-A71 Infection Viruses 2020 3. Tie Zhu et al. SNX11 Identified as an Essential Host Factor for SFTS Virus Infection by CRISPR Knockout Screening Virologica Sinica 2019

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