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-20℃保存

1、長(zhǎng)期存放請(qǐng)分裝后-20℃保存。
2、避免反復(fù)凍融。
3、凍存后溶解時(shí)注意重新混勻。

一年

1. 細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備
2. 離心機(jī)
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒

1.PBS 緩沖液 或者HBSS

1.離心管
2.吸頭

1.盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效。
2.在使用溶液的過(guò)程中，要特別注意避免溶液被細(xì)菌污染。
3.溶液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。
4.以下步驟僅供參考，以實(shí)際使用習(xí)慣為準(zhǔn)。

1. 貼壁細(xì)胞的消化：
（1） 吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
（2） 加入少量溶液，略蓋過(guò)細(xì)胞即可。室溫放置0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
（3） 顯微鏡觀察，如果細(xì)胞明顯收縮并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍頭吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除溶液。加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
（4） 如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則再加入溶液重新消化。
（5） 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用溶液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g離心1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除溶液后，加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2. 組織的消化：
不同的組織需要消化的時(shí)間差異很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。