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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質(zhì)生物學>>蛋白提取和裂解>> 昆蟲蛋白提取試劑盒

昆蟲蛋白提取試劑盒
  • 昆蟲蛋白提取試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 貝博生物
  • 型號
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地
屬性

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更新時間:2024-11-10 10:28:02瀏覽次數(shù):69評價

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產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 昆蟲組織蛋白提取試劑盒適用于從各種昆蟲類細胞、組織中提取總蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內(nèi)完成。 本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細胞膜組份,包括細胞質(zhì)膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。 本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。
保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
WB,IP等
適用樣本
昆蟲
產(chǎn)品特點
1.使用方便。
2.含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
3.紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
4.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產(chǎn)品應(yīng)用
WB,IP等
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項:
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
? 下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測,提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,注意提取過程保持低溫操作,縮短離心時間。
使用方法
1. 提取液制備:
每500 μl冷的昆蟲蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物,4 μl蛋白穩(wěn)定劑,混勻后置冰上備用。
2. 取50-100mg昆蟲組織樣本剪碎,加入500 μl昆蟲蛋白提取液。
3. 用勻漿機/勻漿器充分勻漿。
4. 將勻漿在4℃條件下振蕩20-30分鐘。
5. 在4℃,14000×g條件下離心10分鐘。
6. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,即可得到昆蟲總蛋白。
7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?br>
常見問題分析
1.蛋白濃度低?
處理部分組織樣本時可能沒有裂解,導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

2.細胞裂解速度慢?
為了充分保證提取得到的蛋白的活性,提取液采用的保護蛋白的配方,裂解能力溫和,下游應(yīng)用范圍廣。適當延長裂解的時間即可。

3.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份,導致定量不準。如果已經(jīng)進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用Bradford法定量。

4.提取的蛋白具有活性嗎?
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結(jié)構(gòu),沒有對蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性

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