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小鼠骨髓瘤細胞；P3/NSI/1-Ag4-1品牌本公司專業(yè)代理ATCC細胞，提供售前售后服務，若要獲取詳細的說明書或價格信息，請。
細胞名稱  小鼠骨髓瘤細胞；P3/NSI/1-Ag4-1品牌
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

生長特性 懸浮生長

特征特性 該細胞系是 P3X63Ag8細胞的非分泌型克隆，可合成Kappa鏈但不分泌，表達H-2d，不需HAT。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 保持細胞密度在1×105～1×106 viable cells/ml之間，每周換液2～3次

傳代情況 C2

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權限 A類

小鼠骨髓瘤細胞；P3/NSI/1-Ag4-1品牌操作流程：

※主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡），co2孵箱。
※細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
 ?細胞的復蘇培養(yǎng):從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,同時不斷搖動使之迅速融化，然后用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
 ?細胞傳代:原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
 ?細胞形態(tài)的觀察:在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
 ?生長曲線:取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
 ?細胞的貼壁率:指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
  ?細胞的計數(shù):常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。

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小鼠骨髓瘤細胞；P3/NSI/1-Ag4-1品牌

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