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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×106 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1231 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
詳細(xì)介紹
細(xì)胞詳述
角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不同，中央部最薄。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。
角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)研究角膜的生理學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段，常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長(zhǎng)因子和藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。
該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。
注意事項(xiàng)： 收到細(xì)胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基，不能用來培養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。
2) 細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化 | 1×106 | A01X1231 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔血管外膜成纖維細(xì)胞 | CHO/dhFr-倉鼠卵巢,二氫葉還原缺陷細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
EFHC1蛋白抗體 | AF555標(biāo)記的FAM108A1蛋白抗體 |
PC12低分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 低分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的四度跨膜蛋白3抗體 |
PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻瘤低分化+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的殺菌肽B/天蠶抗菌肽B抗體 |
PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻瘤低分化+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的精子赤道區(qū)域蛋白1抗體 |
PC12高分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 高分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的血管生成樣蛋白2抗體 |
PC12高分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 高分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的G蛋白偶聯(lián)受體137抗體 |
PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 未分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的腫瘤抑制基因ABI2/精氨酪氨蛋白激結(jié)合蛋白抗體 |
PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 未分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體 |
RBL-2H3大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體 |
RBL-2H3大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的小鼠抗聚組氨單克隆抗體 |
RH-35大鼠肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化AF555標(biāo)記的脂氧受體1抗體 |
RH-35大鼠肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的胰腺激抗體 |
RIN-m5f大鼠β胰島瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的磷化造血祖細(xì)胞激抗體 |
CHO倉鼠卵巢 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的接頭蛋白DOK7抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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