化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T | FS-02R6326 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品，必須設(shè)置N+2個提取， 多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）， 一個是NC（樣品制備陰性對照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進行） 10. 如果只做1次重復(fù)，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
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PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
Human bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit 人性/通透性增加蛋白Multi-class antibodies： 48T
TSFP1/SP1 轉(zhuǎn)錄生長因子SP1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit 人成熟促進因子 96T
Phospho-NFKB p65(Ser276) 磷化細胞核因子NF-κB p65抗體 0.1ml
BRF2 表皮生長因子反應(yīng)蛋白2抗體 0.2ml
TSFP1/SP1 轉(zhuǎn)錄生長因子SP1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
MSH(Human melanocyte stimulating hormone) ELISA Kit 人黑色細胞刺Multi-class antibodies： 48T
HER3/ErbB3 HER3受體抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MICA/MHC I MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物1抗體 0.1ml
KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人激肽釋放6 96T
RNF180 環(huán)指蛋白180抗體 0.2ml
CEP89 中心體蛋白89抗體 0.1ml
HER3/ErbB3 HER3受體抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Bov IgG/PE PE標記的兔抗IgG 0.1ml
Gemin 4 脊髓性肌癥蛋白Gemin4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACOX1 過氧化物酰基A氧化1抗體 0.2ml
Mcpt7/Tryptase Beta1/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠肥大細胞蛋白7抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Biotin/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
Phospho-TIF1beta (Ser824)/FITC 熒光標記磷化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
單核細胞增生李斯特氏菌PCR檢測試劑盒組織牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次牡蠣包拉米蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
pcr試劑盒彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
血液牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次箭蛙壺菌探針法熒光定量PCR試劑盒
pcr試劑盒蠟樣芽胞桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
體液牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次腺病D型探針法熒光定量PCR試劑盒
pcr試劑盒炭疽芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
通用型牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次戈氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒
定量PCR擴增檢測試劑盒腺病A型探針法熒光定量PCR試劑盒
細胞牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次芽孢桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
定量PCR擴增檢測試劑盒武氏盾螨探針法熒光定量PCR試劑盒
組織牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次巴貝斯屬蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
定量PCR擴增檢測試劑盒伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
血液牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次放線菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
定量PCR擴增檢測試劑盒不動桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
體液牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次變形絲囊霉菌探針法熒光定量PCR試劑盒
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