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柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 10:32:12瀏覽次數(shù):260

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號(hào) FS-P013402 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:eIF4E (Phospho-Ser209) Antibody
Stathmin 1 (Phospho-Ser16) Antibody
BRCA1 (Phospho-Ser988) Antibody

詳細(xì)介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒

50次

FS-P013402

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。

Phospho-RSK2 (Tyr529) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核糖體S6激RSK2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 Synaptotagmin-4/FITC 熒光標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Agrin 聚集蛋白抗體  0.1ml

Rabbit  Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml

GLP-1 (7-36) 胰高血糖樣肽-1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Goat IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗羊IgG  0.1ml

 Synaptotagmin-4/FITC 熒光標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

HP-CagA-IgG(Human Helicobacter pylori cytotoxin-associated gene A protein IgG) ELISA Kit 人幽門螺桿菌細(xì)胞相關(guān)基因蛋白A-IgGMulti-class antibodies: 48T

 HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh MAVS 線粒體抗病毒信號(hào)MAVS蛋白抗體  0.2ml

CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 人周期依賴性激5 96T

Rab27a RAM-11抗體 0.2ml

CYP11B2 固酮合成CYP11B2抗體 0.2ml

 HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

G1switch 2 G0/G1期開關(guān)調(diào)節(jié)蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Annexin I 膜粘連蛋白 I抗體  0.1ml

 IL-29/IFNL1/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞介29抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗人IgG  0.5ml

 RELN(Reelin)/FITC 熒光標(biāo)記絡(luò)絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒谷氨棒桿菌種屬: Corynebacterium│glutamicum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0141生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

羽扇豆蒼白桿菌種屬: Ochrobactrum│lupini分離基物: Root nodule, Lupinus honoratus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

黑曲霉種屬: Aspergillus│niger提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 66生長(zhǎng)條件: 24℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)ELISA試劑盒甲酯 95%鋅 Anhydrous 硝硫康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)

血管性血友病因子(VWF)ELISA試劑盒7-甲基 98%3.5鋅 粒度 1~2μm舒尼替尼

血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒己甲酯  Standard for GC,>99.5%(GC)3.5鋅 粒度 2~5μm舒尼替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)

血管生長(zhǎng)(ANG)ELISA試劑盒己甲酯  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7% (GC)3.5鋅 粒度 6~10μm,防腐級(jí)蘋果舒尼替尼

血管生成抑制因子(Arresten)ELISA試劑盒(s)-(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)乙酰 99%氟 99%蘋果舒尼替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)

血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)ELISA試劑盒(+)-甲薄荷酯 97%氟化標(biāo)準(zhǔn)溶液 質(zhì)分析標(biāo)準(zhǔn)溶液,1mg/ml 溶液舒洛芬

血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒硫代硫鎂 超純級(jí)氟 Standard for GC ,≥99.6% (GC)他克莫司

血管生成受體/含球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨激2(Tie-2)ELISA試劑盒三氟酮甲酯 97%氟 CP他克莫司(標(biāo)準(zhǔn)品)

血管生成受體/含球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨激1(Tie1)ELISA試劑盒N-甲基-3-吲哚乙 97%氟 分析標(biāo)準(zhǔn)品枸櫞他莫昔芬

血管生成4(ANG-4)ELISA試劑盒4-甲基庚 99%己丁酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)枸櫞他莫昔芬(標(biāo)準(zhǔn)品)

血管生成2(ANG-2)ELISA試劑盒甲基環(huán)己酮 98%己丁酯 ≥98%坦度替尼;MLN518

血管生成1(ANG-1)ELISA試劑盒4-甲基-3- 98%丁位十二內(nèi)酯 98%坦度替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)

血管內(nèi)皮抑抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒(-)2,2′-(3α,8α-二氫-8H-茚并[1,2--d]噁唑 98%丁乙酯 99%替考拉寧

血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒2,2′-[(4,s)-4-基-2-噁唑啉] 97%異戊 98%替尼泊甙,替尼泊苷

血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1)ELISA試劑盒2,2′-[(4,s)-4-叔丁基-2-噁唑啉] 99%異戊 Standard for GC,>99%(GC)替尼泊甙,替尼泊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒氮芥鹽鹽 98%異戊 ≥97%,Kosher富馬替諾福韋酯;泰諾福韋酯


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