大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠前B淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞Walker氏癌肉瘤256瘤株大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞雞動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠背根神經(jīng)細(xì)胞α烯化(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)ELISA試劑盒α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒α酮戊二脫氫(α-KGDHC)ELISA試劑盒α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒α葡萄糖苷(α

組織來源：眼組織

種屬來源：大鼠

細(xì)胞簡介：脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization ，CNV)已成為眼科學(xué)領(lǐng)域的研究 熱點(diǎn)之一 ，  目前多數(shù)體外研究應(yīng)用的是人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞或主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞等容  易得到的大血管內(nèi)皮細(xì)胞。  由于血管內(nèi)皮細(xì)胞具有器官特異性和組織特異性 ，用  大血管內(nèi)皮細(xì)胞的研究結(jié)果很難客觀、準(zhǔn)確地解釋CNV的發(fā)生機(jī)制。  因此 ，建立 脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(choroidal microvascular endothelial cells ，CEC)體外  培養(yǎng)體系 ，對(duì)深入研究CNV相關(guān)疾病具有十分重要的價(jià)值。

培養(yǎng)基：原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：呈鵝卵石樣 ，不規(guī)則細(xì)胞

傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣 ，95%；  CO2 ，  5%
一、細(xì)胞基本屬性

二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三、使用方法

大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈呈鵝卵石樣 ，不規(guī)則細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四、注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。