詳細介紹
一、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
人腮腺細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1362 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠骨骼肌成纖維細胞 | 人前列腺基質(zhì)細胞 |
磷化核突觸蛋白α重組兔單克隆抗體 | AF488標記的Ki67蛋白抗體 |
人皮膚肥大細胞 | AF488標記的組蛋白賴氨N-甲基5C抗體 |
人破骨細胞 | AF488標記的神經(jīng)叢蛋白A3抗體 |
人臍帶血間充質(zhì)干細胞 | AF488標記的巨核細胞刺激因子/蛋白多糖4/淺表層粘膜蛋白多糖抗體 |
人臍帶血來源內(nèi)皮祖細胞 | AF488標記的DNA糖基化FPG2抗體 |
人臍動脈內(nèi)皮細胞 | AF488標記的白細胞介18抗體 |
人臍動脈平滑肌細胞 | AF488標記的細胞核因子/k基因結合核因子 p52/p100抗體 |
人臍靜脈內(nèi)皮細胞 | AF488標記的溶質(zhì)載體家族25成員15抗體 |
人臍靜脈平滑肌細胞 | AF488標記的乙?;M蛋白H4抗體 |
人氣管平滑肌細胞 | AF488標記的KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體 |
人氣管上皮細胞 | 人腮腺細胞AF488標記的間隙連接蛋白43抗體 |
人髂動脈內(nèi)皮細胞 | AF488標記的RSF1蛋白抗體 |
人前列腺癌組織源細胞 | AF488標記的NFE2相關因子樣蛋白3抗體 |
人腎小管上皮細胞 | AF488標記的熱休克蛋白71抗體 |