詳細介紹
組織來源:腎上腺組織
種屬來源:人
細胞簡介:腎上腺是人體相當重要的內分泌器官,位于兩側腎臟的上方。腎上腺左右各一, 腺體分腎上腺皮質和腎上腺髓質兩部分, 周圍部分是皮質,內部是髓質。 腎上腺 包膜主要由成纖維細胞構成。
培養(yǎng)基:原代成纖維細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài):長梭形,不規(guī)則細胞
傳代特性:細胞特性確定傳代
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相: 空氣,95%;CO2 ,5%
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 商品貨號 |
人腎上腺包膜成纖維細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1348 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
人腎上腺包膜成纖維細胞是一種貼壁培養(yǎng)細胞,細胞形態(tài)呈長梭形,不規(guī)則細胞,在技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內;
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品:
人胰腺星狀細胞 | 兔小腸成纖維細胞 |
B細胞特異性轉錄因子OBF-1重組兔單克隆抗體 | 鋅指蛋白350/乳腺癌易感基因1結合蛋白抗體 |
小鼠子宮內膜基質細胞 | 鋅指蛋白266抗體 |
小鼠子宮內膜上皮細胞 | 鋅指蛋白263抗體 |
小鼠棕色脂肪細胞 | 鋅指蛋白239抗體 |
豬骨髓間充質干細胞 | 指蛋白598抗體 |
豬主動脈內皮細胞 | 鋅指蛋白852抗體 |
小鼠膽管成纖維細胞 | 鋅指蛋白568抗體 |
小鼠頸動脈內皮細胞 | 鋅指蛋白449抗體 |
小鼠胎鼠真皮成纖維細胞 | 鋅指蛋白532抗體 |
兔頸動脈內皮細胞 | 鋅指蛋白57抗體 |
人胎盤微血管內皮細胞 | 人腎上腺包膜成纖維細胞組織相容性復合物RTF1抗體 |
兔肺動脈平滑肌細胞 | G蛋白偶聯(lián)受體64抗體 |
人NK細胞 | DNA結合蛋白C抗體 |
小鼠頸靜脈內皮細胞 | 中心體蛋白104抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。