詳細介紹
組織來源:正常股動脈組織
種屬來源:小鼠
細胞簡介:股動脈是下肢動脈的主干,由髂外動脈延續(xù)而來。在腹股溝韌帶中點的深面入股三角。在股三角內,股動脈先位于股靜脈的外側,逐漸從外側跨到股靜脈的前方,下行入收肌管,再穿收肌腱裂孔至腘窩,易名腘動脈。股動脈在腹股溝中點處位置表淺,可摸到搏動,是臨床上急救壓迫止血和進行穿刺的部位。
動脈疾病發(fā)生的一個主要因素是由于血管平滑肌細胞轉變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細胞能表達鈣離子通道,ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表達可能是造成血管壁炎癥反應,并進一步造成血管疾病的原因 。因此,對動脈血管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現和確定新的血管疾病的靶向治療方法。
培養(yǎng)基:原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):長梭形,不規(guī)則細胞
傳代特性:根據細胞特性
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 商品貨號 |
小鼠股動脈平滑肌細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1787 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
小鼠股動脈平滑肌細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈長梭形,不規(guī)則細胞,在技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內;
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
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四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。