詳細介紹
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
參數規(guī)格:
產品名稱:轉基因品系油菜46A16探針法qPCR試劑盒
產品規(guī)格:50次
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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服務流程:
1、根據客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針(染料法只需設計引物)
2、抽提DNA、RNA,并對RNA進行逆轉錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結果報告(檢測數據、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品(引物、RNA和cDNA)
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
NHS-biotin;生物素琥珀酰亞酯 Cadherin-6 (D3T3I) Rabbit mAb2,二酚
消旋腎上腺素;DL-腎上腺素AMPKα (D5A2) Rabbit mAb (Biotinylad)BOC-D-絲氨酸甲酯
雷貝拉唑鈉(標準品)Claudin-2 (E1H9O) Rabbit mAb2,5-二羥
雷貝拉唑鈉IκBα (44D4) Rabbit mAb3,二甲
頭孢克肟USP18 (D4E7) Rabbit mAb2,5-二
頭孢克肟(標準品)USP18 (D4E7) Rabbit mAb紅色KB/5--2-
咪草煙IκBα (L35A5) Mouse mAb (Amino-rminal Antigen)2--5-
O-去甲文拉法辛(R型)IκBα (L35A5) Mouse mAb (Amino-rminal Antigen)2,5-二
O-去甲文拉法辛(S型)RANK Ligand (L300) Antibody間二酚
奧美沙坦SP Antibody交酯
1,二氨基胍鹽酸鹽 GSK-3α (D80D1) XP® Rabbit mAb美羅培南側鏈
3,5-二-L-甲狀腺素,3,5-二甲腺原氨酸GABA(B)R2 (C44A4) Rabbit mAb(4R,5S,6S)-[[(3S,5S)-5-[(二甲基氨基)甲?;?1-[[(硝基芐基)氧]羰基]-吡咯烷基]硫]-6-[(1R)-1-羥基]-甲基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2--2-羧酸 硝基芐基酯
短葉松素(標準品)CREB (D76D11) Rabbit mAb美羅培南
環(huán)孢素D Akt (pan) (40D4) Mouse mAb (Biotinylad)甲基酸酯
帕比司他CDC20 Antibody2-氨基-1-丁
HDAC靶點抑制劑Cardiogenesis Marker Antibody Sampler Kit戊酮
鹽酸洛美利PAK2 (3B5) Mouse mAb酸甲酯
酯蟾毒配基;蟾力蘇(標準品)MacroH2A1.2 Antibody吡咯烷酮
轉基因品系油菜46A16探針法qPCR試劑盒冰凍切片細胞有絲分裂熒光顯微鏡 KPNA5 100 ul
石蠟切片細胞細胞有絲分裂熒光顯微鏡 KPNA4(Karyopherin subunit alpha-4) 20 ml
載玻片細胞有絲分裂NBT顯色 KPNA6(Karyopherin subunit alpha-6) 100 ml
冰凍切片細胞有絲分裂NBT顯色 KPTN 100 ul
石蠟切片細胞有絲分裂NBT顯色 KRAP/SSFA2 100 ul
HOECHST33342簡易細胞核形態(tài)染色 KRAS(GTPase KRas) 500 ul
HOECHST33342/PI簡易細胞核形態(tài)染色 KLHDC5 100 ul
吖啶橙簡易細胞核形態(tài)染色 KRR1 100 ul
PROPIDIUM IODIDE簡易細胞核形態(tài)染色 KRI1 100 ul
DAPI簡易細胞核形態(tài)染色 KLHDC4 100 ul
ETHIDIME BROMIDE簡易細胞核形態(tài)染色 KLHL32 100 ul
羅丹明123簡易細胞核外形態(tài)染色 KLHL35 100 ul
HOECHST33258簡易細胞核形態(tài)染色 KLHL34 1 Kit
同位素標記法細胞端粒酶活性TRAP電泳分析 KRT12 100 ul
同位素標記法組織端粒酶活性TRAP電泳分析 KLHL10 20 ul
熒光標記法細胞端粒酶活性TRAP電泳分析 KRT33B 100 ul