詳細介紹
組織來源:正常頸動脈組織
種屬來源:小鼠
細胞簡介:頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內(nèi)動脈,前者分布至頭頂部和顏面部,后者進入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。血管疾病發(fā)生一個主要因素是由于血管平滑肌細胞轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。因此,對動脈血管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管疾病的靶向治療方法。
培養(yǎng)基:原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):長梭形,不規(guī)則細胞
傳代特性:根據(jù)細胞特性。
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
一、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
小鼠頸動脈平滑肌細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1782 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
小鼠頸動脈平滑肌細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈長梭形,不規(guī)則細胞,在技術(shù)部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠視網(wǎng)膜Muller細胞 | P388 D1 細胞專用培養(yǎng)基 |
ADP核糖基化因子6重組兔單克隆抗體 | 堿性磷(AP)標記的鋅指蛋白518抗體 |
MIA-PACA-2 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的NAALADL2蛋白抗體 |
MHCC-97L 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的EHD4蛋白抗體 |
MHCC-97H 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的腺苷單磷活化蛋白激β2抗體 |
MGC-803 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的TRK融合基因蛋白抗體 |
NR8383 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的血管內(nèi)皮鋅指蛋白1抗體 |
NRK-52E 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的同源盒蛋白Meis1抗體 |
OAR-L1 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的嗅覺受體5M1抗體 |
OKT11 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體(乳頭狀甲狀腺癌編碼蛋白) |
OLN-93 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白2抗體 |
OP9 細胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠頸動脈平滑肌細胞堿性磷(AP)標記的磷化帕金蛋白抗體 |
OS-RC-2 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域1/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移1抗體 |
P19 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的19號染色體開放閱讀框45抗體 |
PK-13 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷(AP)標記的細胞角蛋白5抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。