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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鼠PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013552
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
LEF-1/FITC 熒光標(biāo)記增強(qiáng)因子-1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Snake poison Protein/FITC 熒光標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKT3 蛋白激B3 0.1ml
Rabbit horse IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
phospho-GAP43 (Ser41) 磷化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Snake poison Protein/FITC 熒光標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
HbC(Human Hemoglobin C) ELISA Kit 人血紅蛋白CMulti-class antibodies： 48T
Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383) 磷化抑制基因PTEN抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HBeAg(2E6) 人乙型肝炎e抗原單克隆抗體(2) 0.1ml
MBP ELISA Kit 大鼠髓磷脂性蛋白 96T
Prostate and colon associated protein 前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白 0.2ml
phospho-B-Raf (Ser365) 磷化B-Raf抗體 0.1ml
Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383) 磷化抑制基因PTEN抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey rabbit IgG/PE PE標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
GCNT2 β1-6 N-乙?；咸烟寝D(zhuǎn)移2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體 0.2ml
Iba-1/FITC 熒光標(biāo)記離子鈣接頭蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
PRAS40/AKT1 substrate 1/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激AKT底物1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鼠PCR試劑盒50次普通變形桿菌種屬: Proteus│vulgaris提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 598生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium palustre提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 地中海粉蛾提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 348生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
乙醇假絲酵母種屬: Candida│ethanolica提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA試劑盒四 ACS，>99.5% (GC) 甲鈣 96%二十八(>98%,BR)
β2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒四乙烯 CP，97%偏釩鈉 AR,99.0% 1-基-5-巰基四氮唑(>98.5%,BR)
β1,4-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移2(B4GALNT2)ELISA試劑盒硫代乙 AR,90.0%五二釩 AR,99.0%（劇品）新戊二(>98%,BR)
α烯化(αENOL)ELISA試劑盒硫代乙 GR,98%4，4'-二（9-咔唑）聯(lián) 98%2,2-二甲基琥珀(>99%,BR)
α烯化(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)ELISA試劑盒硫代乙 CP,85.0%(R)-(+)-N-叔丁氧羰基-3-氨基吡咯 97%2,4,5-氧基甲(>99%,BR)
α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒3,5,5-基己 97%(s)-(-)-N-叔丁氧羰基-3-氨基吡咯 98%三溴酚(>98%,BR)
α酮戊二脫氫(α-KGDHC)ELISA試劑盒叔丁 HPLC，>99.5%(GC)1-Boc-3-(甲氨基) 97%2,4,6-三(二甲氨基)酚(>95%,BC)
α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒叔丁 GR，≥99.5% (GC)2-甲基－8-羥基喹啉對羥基聯(lián)合鋁 95%2,4-二甲基(>98%,BR)
α葡萄糖苷(α-glucosidase)ELISA試劑盒三乙二 99%并噻唑-2-乙 98%2,4-二甲(BR)
α葡萄糖苷(α-Glu)ELISA試劑盒硫二甲酯 AR,98.5%（劇品）鹽西替利 98%2,7-二羥基萘(>98%,BR)
α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒磺胍 98%4,4'-二聯(lián) 98%2, 6-二醌-4-亞(>98%,BR)
α-內(nèi)肽(α-EP)ELISA試劑盒磺嘧啶鈉鹽 98%1-芐基-3-乙氧羰基-4-酮鹽鹽 98%2-金剛(>99%,BR)
α肌動(dòng)蛋白(α Actin)ELISA試劑盒磺 AR,99.8%(S)-1-Boc-3-羥基吡咯 98%2-金剛酮(>99%,BR)
α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)ELISA試劑盒磺 GCS，>99.8%(HPLC)(R)-3-羥基吡咯鹽鹽 98%2-氨基-3-甲(>98%,BR)
α黑色(α-MSH)ELISA試劑盒磺 分析標(biāo)準(zhǔn)品1,1,7,7-四甲基－8-羥基-9-基-久洛尼定 99%2-溴丁(>98%,BR)
α谷胱甘*S轉(zhuǎn)移(α-GST)ELISA試劑盒鄰二甲二烯酯 CP2,2′-[(4，s)-4-叔丁基-2-噁唑啉] 99%2-溴代萘
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