服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
3,二甲氧基肉桂酸(標(biāo)準(zhǔn)品)NF-κB1 p105 Antibody2-基酸

頭孢地鈉NF-κB1 p105 Antibody托可索侖

頭孢地尼Aurora A/AIK (1G4) Rabbit mAb聚吡咯烷酮

Boc-D-谷氨酰Aurora A/AIK (1G4) Rabbit mAb羧甲基纖維素

赤霉素A4+7Snail (SN9H2) Rat mAb鄰氨基噻吩(2鹽酸)

Alectinib；CH54248024F2hc/CD98 (D3F9D) XP® Rabbit mAb雙三氟磺酰亞鋰

對(duì)甲氧基肉桂酸TRAF2 (C192) Antibody殼聚糖

5-羥基色鹽酸鹽,血清鹽酸鹽TRAF2 (C192) Antibody2,二-7H吡咯[2,D]嘧啶

巨大戟(標(biāo)準(zhǔn)品)p48 Primase (8G10) Rat mAb2-氟-6-甲酸

阿糖尿苷;1-β-D-阿糖呋喃脲嘧啶p58 Primase (8D3) Rat mAb2-基丁酸

β-香樹(shù)素(標(biāo)準(zhǔn)品)c-Rel Antibody甲基傘形酮

頭孢磺啶鈉c-Rel Antibody6-HYDROXY-PYRIDINEBORONIC ACID

鄰二甲β2-Chimerin (2E3) Rat mAb-5-氟甲

醋酸美倫孕酮; 甲雌酸酯TRAF3 Antibody鷹爪豆

膽固酯酶;膽甾酯酶TRAF3 Antibody鄰氨基聯(lián)

1,9-吡唑并蒽酮;SP600125Pim-2 (D1D2) Rabbit mAb蒽酮

別隱品;A-別隱品(標(biāo)準(zhǔn)品) Pim-2 (D1D2) Rabbit mAb(S)-疏基吡咯烷-1-基)亞基氨酸對(duì)硝基芐酯

LGD-4033 ORC1 (7A7) Rat mAb3,4,5-三甲氧基肉桂酸
轉(zhuǎn)基因品系油菜46A12化體 PCR試劑盒細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)（DNA合成抑制）　LPHN3 　100 ul

細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)（DNA損傷）　LRR 1(Leucine-rich repeat protein 1) 　100 ul

細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)（DNA酶抑制）　LPP 　20 ul

BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖比色法定量　LPIN2 　100 ul

BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖熒光定量　LPPR2 　100 ul

BrdU標(biāo)記法載玻片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡　LPXN 　100 ug

BrdU標(biāo)記法組織冰凍切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡　LRAT 　100 ul

BrdU標(biāo)記法組織石蠟切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡　LPIN2 　100 ul

BrdU標(biāo)記法載玻片細(xì)胞繁殖NBT顯色　LRCH1 　10 mg

BrdU標(biāo)記法組織冰凍切片細(xì)胞繁殖NBT顯色　LPPR2 　100 ul

BrdU標(biāo)記法組織石蠟切片細(xì)胞繁殖NBT顯色　LPP 　100 ul

冰凍切片組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色　LMNB2 　100 ul

細(xì)胞衰老特異性脂褐素靛酚原位染色（適合與紅細(xì)胞分別；不適合人體心肌和小鼠腦組織）　LPXN 　300 ul

全組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色　LMF2 　400 ul

冰凍切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色　LRAT 　100 ul

石蠟切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位間接染色　LRCH1 　100 ul
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
     Taq酶（2U/μl）            1μl
     DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
      加ddH2O至               50 μl
    視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。