化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
組織來(lái)源：腦動(dòng)脈
種屬來(lái)源：兔
細(xì)胞簡(jiǎn)介：腦動(dòng)脈為肌型動(dòng)脈，管壁薄，血管周圍沒(méi)有支持組織。但腦動(dòng)脈血管內(nèi)膜厚，有發(fā)達(dá)的內(nèi)彈力膜。
血管新生是從原有血管系統(tǒng)的內(nèi)皮細(xì)胞增殖、游走而形成新的子代血管分支的過(guò)程。腦動(dòng)脈新生可以重建有效血供，從而改善多發(fā)性、彌漫性腦動(dòng)脈粥樣硬化所致的腦缺血，終預(yù)防癡呆和腦梗死發(fā)生。
培養(yǎng)基：原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2190 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠腎臟巨噬細(xì)胞 | PC-12 (低分化) (大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)) (種屬鑒定正確) |
T細(xì)胞表面糖蛋白CD1C重組兔單克隆抗體 | 生物標(biāo)記的共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體 |
IAR20 (大鼠肝細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的磷化埃茲蛋白抗體 |
INS-1 (大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的α紅細(xì)胞分化相關(guān)因子抗體 |
IR983F (大鼠骨髓瘤細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的FAM193B蛋白抗體 |
LLC-WRC 256 [Walker 256] (大鼠腹水癌細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 |
PC-12 (未分化) (大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化)) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的死亡結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 |
RBL-1 (大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的鋅指蛋白596抗體 |
RIN-m5F (大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的膜內(nèi)在蛋白NOD26抗體 |
RK1 (大鼠腎細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的2型豬鏈球菌溶血抗體 |
RL1 (大鼠肺成纖維樣細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的β半乳糖苷抗體 |
RS1 (大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞) | 兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞生物標(biāo)記的NFE2相關(guān)因子1抗體 |
RTE (大鼠氣管上皮細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的整合β1/Integrin β1抗體 |
UMR-106 (大鼠骨肉瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的MID1相互作用蛋白1抗體 |
人肺動(dòng)脈高壓血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 生物標(biāo)記的半胱氨蛋白8抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。
化工儀器網(wǎng)