參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:利什曼原蟲(chóng)通用染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013458
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
Human T-box protein 3 ELISA Kit(human) 人轉(zhuǎn)錄因子Tbx3 ELISA試劑盒Multi-class antibodies: 96T
SSTR5 生長(zhǎng)抑受體5抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗人IgG 0.3ml
Human c-jun ELISA Kit 人c-jun 96T
C9orf156 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框156抗體 0.1ml
BATF B細(xì)胞轉(zhuǎn)錄激活因子抗體 0.1ml
SSTR5 生長(zhǎng)抑受體5抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Hb-AGE(Human hemoglobin-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物Multi-class antibodies: 48T
phospho-c-Raf (Ser296) 磷化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HABP2 透明質(zhì)結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
HSP-70 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白70 96T
PTEN 一種抑制基因抗體(C端) 0.1ml
BAI1 腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體 0.2ml
phospho-c-Raf (Ser296) 磷化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit rat IgM/Bio 生物標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
GALR1 甘丙肽受體1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APOC3 載脂蛋白C3抗體 0.2ml
gp130/IL-6R /FITC 熒光標(biāo)記白介-6受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 0.1ml
prox-1 /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠prox-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
利什曼原蟲(chóng)通用染料法熒光定量PCR試劑盒熱帶假絲酵母種屬: Candida│tropicalis提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料培養(yǎng)基: 13生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
海氏腸球菌種屬: Enterococcus│hirae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0214生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
海沈氏菌種屬: Shimia│marina分離基物: 生物樣/生物膜提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株;產(chǎn)微生物/硝鹽還原培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
小克銀漢霉種屬: Cunninghamella│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0091生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
硫類肝(HS/HPS)ELISA試劑盒鋅粒 99.99% metals basis亞鐵化鈉 CP5'-三腺苷(ATP)
硫類肝(HS)ELISA試劑盒超純鋅粒 棒狀,99.9999% metals basis原甲酯 98%布林佐
硫角質(zhì)(KS)ELISA試劑盒鋅 99.999% metals basis原甲三乙酯 99%布林佐(標(biāo)準(zhǔn)品)
硫雌酮(E1S)ELISA試劑盒鋅粒 SP氟化銨 AR,98%羅硝唑
硫S-甲基轉(zhuǎn)換(TPMT)ELISA試劑盒雙環(huán)己酮草酰二腙 AR氟化銨 GR,98%羅硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
硫化氫(H2S)ELISA試劑盒二乙酰一肟 AR氟化氫銨 AR,98.5% 屈膦二鈉四合物
鱗狀癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA試劑盒間甲基紅 Indicator氫氟 AR,40.0%乙基纖維
鱗狀癌抗原1(SCCAg1)ELISA試劑盒米氏酮 98%氟 AR,40.0%維生 K1
鱗狀上皮癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒4-硝基 CP氟 CP,40.0%9-氨基米諾環(huán)鹽鹽
酯酰肌特異性酯C(PIPLC)ELISA試劑盒4-硝基 98%氟 49.5-50.5%溶液阿法替尼
酯Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒硝氮黃 Indicator氨基胍碳?xì)潲} 98.5%阿扎那韋硫鹽
酯C(PLC)ELISA試劑盒乙基黃原 AR,95%三氧化二銻 99.99% metals basis阿扎那韋硫鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(PLTP)ELISA試劑盒酯 ≥99%, FCC三氧化二銻 AR,99.5%亞培南-西司他丁鈉
脂轉(zhuǎn)移蛋白β(PITPNB)ELISA試劑盒酯 98%重去甲腎上腺 ≥98%(HPLC),USP長(zhǎng)春西丁,長(zhǎng)春西汀
脂酰乙(PEth)ELISA試劑盒酯 Standard for GC,≥99.5%(GC)L-去甲腎上腺 98%妥英鈉
脂酰絲氨(PS)ELISA試劑盒月桂鈉 98%辛弗林 98%奧卡西平
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。