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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：大口黑鱸虹彩病毒（LMBV）PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-02R6477
產(chǎn)品規(guī)格：48T
產(chǎn)品分類：水產(chǎn)養(yǎng)殖病害檢測系列（恒溫熒光法）
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
MLCK/FITC 熒光標記肌球蛋白輕鏈激抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TREML1/TLT1/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體樣轉錄因子1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCG4 ABC膜轉運蛋白抗體 0.1ml
Mouse Guinea pig IgG/Cy5 Cy5標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GnRHR 促性腺釋放受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RAB4 癌基因RAS相關蛋白Rab4A抗體 0.2ml
TREML1/TLT1/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體樣轉錄因子1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PDGFsR- Alpha(Human Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor Alpha) ELISA kit 人血血小板衍生生長因子可溶性受體αMulti-class antibodies： 48T
E1 glycoprotein 風疹病毒糖蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG ascites 小鼠抗羊IgG腹 1ml
VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit 人血管活性肽抑制劑 96T
RNASE4 血管生成核糖核4抗體(肌性側索硬化癥蛋白) 0.1ml
CREG2 E1A激活基因刺激蛋白2抗體 0.2ml
E1 glycoprotein 風疹病毒糖蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit chicken IgM/AP 性磷(AP)標記的兔抗雞IgM 0.1ml
GOLPH2 高爾基體膜蛋白GP73抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS2 整合樣金屬蛋白與2型抗體 0.2ml
MAGE-1/HLA-A1 protein /FITC 熒光標記黑瘤抗原-1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗IgM 0.1ml
Tenascin/TN /FITC 熒光標記細胞粘合抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
大口黑鱸虹彩病毒（LMBV）PCR檢測試劑盒組織副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）pcr試劑盒20次小鼠β內(nèi)啡肽受體elisa檢測試劑盒
體液副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）pcr試劑盒20次小鼠E選擇elisa檢測試劑盒
糞便副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）pcr試劑盒20次小鼠P選擇elisa檢測試劑盒
環(huán)境副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）pcr試劑盒20次大鼠卵泡抑elisa檢測試劑盒
通用型副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴增檢測試劑盒20次大鼠糖蛋白130elisa檢測試劑盒
組織副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴增檢測試劑盒20次大鼠促腎上腺皮質(zhì)elisa檢測試劑盒
體液副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴增檢測試劑盒20次小鼠轉化生長因子β1elisa檢測試劑盒
糞便副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴增檢測試劑盒20次小鼠γ干擾elisa檢測試劑盒
環(huán)境傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴增檢測試劑盒20次小鼠氧化低密度脂蛋白elisa檢測試劑盒
副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2次大鼠胱天蛋白3elisa檢測試劑盒
通用型副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次大鼠雙氫睪酮elisa檢測試劑盒
組織副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次大鼠Eelisa檢測試劑盒
體液副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次大鼠D2elisa檢測試劑盒
糞便副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次大鼠抵抗elisa檢測試劑盒
環(huán)境副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次小鼠褪黑elisa檢測試劑盒
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