詳細(xì)介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Chicken insulin like growth factor 1 (IGF-1) ELISA Kit | FS-C5516 |
ELISA試劑盒優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
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操作要點:
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
secreted frizzled-related protein 1分泌型卷曲相關(guān)蛋白1種屬: Pyrenochaeta│lycopersici R.W. Schneid. & Gerlac茄棘殼孢
secretory immunoglobulin A分泌型免疫球蛋白A種屬: Babesia│caballi巴貝斯蟲(青海剛察株)
Claudin-1封閉蛋白1種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5α/pET43.1a-PknA
replication protein A復(fù)制蛋白A種屬: Phomopsis│theae Petch茶潰瘍擬莖點霉
Calpain鈣蛋白酶種屬: Lewia│infectoria (el) M.E. Barr & E.G. Simmons侵染鏈格孢
Calcium-independent phospholipase A2鈣非依賴型磷脂酶A2種屬: Eimeria│praecox雞早熟艾美爾球蟲(LZ株)
calcium鈣離子種屬: Bacillus│thuringiensis subsp. shandongiensis蘇云金芽孢桿菌山東變種
voltage-gated calcium channel鈣離子通道抗體種屬: Salmonella│Blockley布洛克利沙門菌
calcineurin鈣調(diào)磷酸酶種屬: Pelagimicrobium│weihaiensis gen. nov., sp. nov.威海海洋菌
calmodulin鈣調(diào)素種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5a/phA3G(1-156)-Flag
calcium;calmodulin-dependent protein kinase-1α鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶1α種屬: Alternaria│brassicae (Berk.) Sacc.菜豆鏈格孢
calcium;calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2種屬: Filobasidium│floriforme花狀絨黑粉類酵母
Calprotectin鈣衛(wèi)蛋白種屬: Jannaschia│seosinensis瑞山簡納西氏菌
Glycine甘氨酸種屬: Cylindrocladium│ovatum卵孢柱枝孢
Glycine N-methyltransferase甘胺酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶種屬: Paracoccus kocuriiParacoccus kocurii
雞胰島素樣生長因子1ELISA檢測試劑盒氨基丙酮合成酶抗體1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene別名: 分子式: C12H12N2O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體2,5-Bis(4-diethylaminophenyl)-1,3,4-oxadiazole別名: 分子式: C22H28N4O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
高爾基體卷曲螺旋蛋白2抗體1,3-Bis[2-(4-aminophenyl)-2-propyl]benzene別名: 分子式: C24H28N2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
戊二酰輔酶A脫氫酶抗體4,4'-Cyclohexylidenebisphenol別名: Bisphenol Z分子式: C18H20O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
GTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體2,2'-Dithiobisbenzanilide別名: 分子式: C26H20N2O2S2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體3,9-Bis(2-cyanoethyl)-2,4,8,10-traoxaspiro[5.5]undecane別名: CTU分子式: C13H18N2O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
廣泛控制氨基合成1樣蛋白1抗體2,6-Bis(hydroxymethyl)-p-cresol別名: 分子式: C9H12O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶2抗體4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene別名: 熒光增白劑 OB-1分子式: C28H18N2O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
ELISA試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。