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詳細(xì)介紹
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
小鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1992 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
雞肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | NCI-H1819[H1819]細(xì)胞 |
類胡蘿卜裂解雙加氧8抗體 | Cy7標(biāo)記的Rho GTP激活蛋白26抗體 |
NCC-StC-K140細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的7號(hào)染色體開放閱讀框63抗體 |
NCIADRRES細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的膜相關(guān)蛋白酪氨激Lyn抗體 |
NCI-H1048細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的視網(wǎng)膜色變性蛋白26抗體 |
NCI-H1092細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的髓系/淋巴或混合型白血病11抗體 |
NCI-H1155細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的DIP13β抗體 |
NCI-H1341細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的NADPH氧化激活蛋白1抗體 |
NCI-H1373細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的串珠狀纖維結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 |
NCI-H1417[H1417]細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的過量位點(diǎn)蛋白5抗體 |
NCI-H1435細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體 |
NCI-H1568細(xì)胞 | 小鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞Cy7標(biāo)記的S100B蛋白抗體 |
NCI-H1573細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的7號(hào)染色體開放閱讀框26抗體 |
NCI-H1581細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的P53應(yīng)答基因蛋白5抗體 |
NCI-H1793細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的轉(zhuǎn)化生長因子β1結(jié)合蛋白1抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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