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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：甲型肝炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013441
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
LH/Biotin 生物標記抗人促黃體生成抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
STAT5/FITC 熒光標記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗羊IgM 0.1ml
GOLGA6L4 高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗狗IgG 0.1ml
STAT5/FITC 熒光標記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PGE2(Human Prostaglandin E2) ELISA Kit 人前列腺E2Multi-class antibodies： 48T
EDG2/LPA1 溶血磷脂受體蛋白1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL11 Kelch樣蛋白11抗體 0.2ml
PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 96T
PTP4A2 肝再生磷酯2抗體 0.2ml
CAMKK2 鈣調(diào)蛋白激激β抗體 0.1ml
EDG2/LPA1 溶血磷脂受體蛋白1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit rat IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
GDE3 促進成骨細胞分化因子抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh API5 凋亡抑制因子5抗體 0.1ml
IL-13Ra1/FITC 熒光標記白細胞介-13受體a1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/Cy3 Cy3標記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
PTHrP/FITC 熒光標記甲狀旁腺相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
甲型肝炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒問號狀鉤端螺旋體種屬: Leptospira│interrogans提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分型 Tarassovi tarassovi培養(yǎng)基: CM0114生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi F4 9,12,Vi d -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
綠色木霉種屬: Trichoderma│viride提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0091生長條件: 28-30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
海川西氏菌種屬: Henriciella│marina分離基物: 樣/海提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 1001生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
鞘脂(SM)ELISA試劑盒丁異戊酯 99%順-6-壬烯 95%富馬酮替芬
鞘氨激1(SPK1)ELISA試劑盒丁異戊酯 GCS，≥99.5% (GC)順-6-壬烯 95%,FG富馬酮替芬(標準品)
鞘氨(SPH)ELISA試劑盒丁異戊酯 ≥98%, FCC, Kosher, FG丁位壬內(nèi)酯 98%酮咯
橋粒芯糖蛋白3(Dsg-3)ELISA試劑盒己異丁酯 98%乙橙花酯 95%來氟米特
橋粒芯糖蛋白2(DSG2)ELISA試劑盒乙異戊酯 AR，99%正辛 AR,99.0%來氟米特（標準品）
橋粒芯糖蛋白1(Dsg-1)ELISA試劑盒乙異戊酯 CP，98%1-辛 99%左氧氟沙星
橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒乙異戊酯 ≥99%, FCC, FG1-辛 97%左氧氟沙星（標準品）
橋粒糖蛋白2(DSC2)ELISA試劑盒甲異戊酯 mixture of isomers, ≥97%, FG羅勒烯 90%諾昔康
羥脯氨糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒異戊酯 97%桂乙酯 96%諾昔康(標準品)
羥脯氨(Hyp)ELISA試劑盒乙芳樟酯 96%3- 99%洛沙坦/沙坦
羥賴氨糖苷(HOLG)ELISA試劑盒乙酰 AR,99.0%3- ≥98%, FCC洛沙坦/沙坦
羥賴氨(Hyl)ELISA試劑盒葉 98%3- GR，99%馬賽替尼
羥甲基戊二單酰輔A還原(HMG-CoAR)ELISA試劑盒芳樟 98%3- 95%美西林/氮脒青霉
羥甲基戊二單酰輔A(HMG-CoA)ELISA試劑盒DL-乳 ACS, ≥85%3- ≥95%, FCC甲羥孕酮/安宮黃體
羥基賴正己氨(HLNL)ELISA試劑盒月桂 AR，98%異丁氧基乙酯 98%甲羥孕酮(標準品)
羥基膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)ELISA試劑盒丁甲酯 Standard for GC，>99.5% (GC)異丁氧基乙酯 ≥98%, FCC甲巰咪唑/他巴唑/2-巰基-1-甲基咪唑
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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