化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
組織來源：骨髓
種屬來源：兔
細胞簡介：兔骨髓單核細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞，在骨髓細胞中約占0.04%，被認(rèn)為是破骨細胞的前體細胞，較外周血單個核細胞誘導(dǎo)的破骨細胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細胞數(shù)量多，純度高，較脾細胞誘導(dǎo)法分化效率高。骨髓單核細胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞，它屬干細胞類型。目前，大多數(shù)研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞，近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞。
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：巨噬細胞樣
傳代特性：不增殖；不傳代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
傳代比例：不傳代
一、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
兔骨髓單核細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X2185 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
兔骨髓單核細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈巨噬細胞樣，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠精原干細胞 | HEC-1-A (人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) (STR鑒定正確) |
翻譯延伸因子EF-1a重組兔單克隆抗體 | Cy5標(biāo)記的FLJ40288蛋白抗體 |
Eca-109 (人食管癌細胞) (Hela污染細胞系) | Cy5標(biāo)記的磷化Ephrin B抗體 |
ES-2 (人卵巢透明細胞癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標(biāo)記的FAM58A蛋白抗體 |
FaDu (人咽鱗癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標(biāo)記的真核翻譯起始因子2C4抗體 |
GBC-SD (人膽囊癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標(biāo)記的2號染色體開放閱讀框18抗體 |
GNM (人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞) | Cy5標(biāo)記的T淋巴細胞激活蛋白抗體 |
H4 (人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞) | Cy5標(biāo)記的有機溶質(zhì)載體蛋白1抗體 |
HBL-100 (人整合SV40基因的乳腺上皮細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標(biāo)記的G蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體 |
HCC1937 (人乳腺癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標(biāo)記的環(huán)氧合2/前列腺內(nèi)過氧化物合成2單克隆抗體 |
HCC827 (人非小細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標(biāo)記的纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體 |
HCCC-9810 (人膽管細胞型肝癌細胞) (STR鑒定正確) | 兔骨髓單核細胞Cy5標(biāo)記的藍色熒光蛋白的工程變體蛋白單克隆抗體 |
HCT 116 (人結(jié)腸癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標(biāo)記的G蛋白結(jié)合蛋白RAB相互作用蛋白抗體 |
HCT-15 (人結(jié)直腸腺癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標(biāo)記的白細胞介10抗體 |
Hs 578T (人乳腺癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標(biāo)記的酪氨蛋白激受體A1抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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