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基孔肯尼雅病毒RT-PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 11:04:33瀏覽次數(shù):200

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013440 應用領域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
基孔肯尼雅病毒RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:9002-07-7胰蛋白酶(豬胰) 100克動物脂肪組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒
蛇形毛圓線蟲PCR試劑盒國產(chǎn)動物腎上腺組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒
54957-90-3喹啉硫酸鹽動物骨組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒
6138-23-4D-海藻糖動物腦組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒

詳細介紹

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

基孔肯尼雅病毒RT-PCR試劑盒

50次

FS-P013440

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

L-HDC /FITC 熒光標記L-組脫羧抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 STAT6 /FITC 熒光標記信號轉導和轉錄激活因子6抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh AEV polyprotein 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體  0.1ml

Rabbit  Goat IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗羊IgM 0.1ml

GLTPD2 糖脂轉移蛋白結構域2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  dog IgG/Gold 膠體金標記的兔抗狗IgG  0.5ml

 STAT6 /FITC 熒光標記信號轉導和轉錄激活因子6抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit 人間變性瘤激Multi-class antibodies: 48T

 Phospho-NMDAR1 (Ser897) 磷化谷受體1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IGFR3/CD16 FC段γ受體3/球蛋白G Fc段受體III抗體  0.1ml

RANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit 小鼠核因子κB受體活化因子配基 96T

PTPH1 蛋白酪磷H1抗體 0.2ml

ChAT ChAT膽乙酰轉移抗體 0.1ml

 Phospho-NMDAR1 (Ser897) 磷化谷受體1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rabbit  rat IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml

GTDC1 糖基轉移樣1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh API2 凋亡抑制因子2抗體  0.2ml

 IL-13Ra2/FITC 熒光標記白細胞介-13受體a2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human sIgA/Bio 生物標記的兔抗人分泌型IgA  0.1ml

 Survivin/RBITC 紅色熒光羅丹明標記 Survivin 蛋白抗體(標記抗體)Multi-class antibodies: 0.2ml
基孔肯尼雅病毒RT-PCR試劑盒谷氨棒桿菌種屬: Corynebacterium│glutamicum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產(chǎn)L-色氨。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

意大利游動放線菌種屬: Actinoplanes│italicus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: Type strain;培養(yǎng)基: 0011生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

黃曲霉種屬: Aspergillus│flavus分離基物: 曲藥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 釀酒,產(chǎn)蛋白培養(yǎng)基: 0416生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

趨化因子配體17(CXCL17)ELISA試劑盒正己 AR,99.0%2-甲基-1-基-2- ≥97%格列美脲(標準品)

趨化因子CXCL16(CXCL16)ELISA試劑盒己葉酯 98%橡苔 98%格列美脲

趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA試劑盒己葉酯 98%,Kosher 甲基庚烯酮 98%灰黃霉

趨化因子26(CCL26)ELISA試劑盒正庚 Standard for GC,>99.5%(GC)二甲基丁葉酯 98%灰黃霉(標準品)

趨化因子2(CXCL2)ELISA試劑盒正庚 99%二甲基丁葉酯 ≥98%, FCC, Kosher透明質鈉;玻璃鈉

趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒正庚 分析標準品,99.8%(GC)麥芽酚 ≥98.5%,natural, FG

趨化因子(FK)ELISA試劑盒乙正己酯  99%橙花叔 97%, Mixture of cis and trans(標準品)

趨化因子(CCL5/RANTES)ELISA試劑盒乙正己酯 CP,98%橙花叔 ≥97.0%,Mixture of cis and trans, FCC氫右美沙芬

驅動蛋白家族成員27(KIF27)ELISA試劑盒乙正己酯 分析標準品,≥99.5% (GC) 椰子 98%, FCC, Kosher氫右美沙芬(標準品)

清道夫受體類B成員1(SCARB1)ELISA試劑盒葉酯  97%橙花   97%富馬伊布利特

清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒柳己酯 98%乙位萘乙 99%富馬伊布利特(標準品)

輕鏈鐵蛋白(L-ferritin)ELISA試劑盒己異戊酯  98%乙位萘乙 食品級,Kosher硫異帕米星

青少年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒異戊異戊酯 98%反,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)蓓薩羅丁;貝沙羅汀

親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA試劑盒異丁 standard for GC, ≥99.5% (GC)正壬 96%蓓薩羅丁(標準品)

切除修復交叉互補基因1(ERCC1)ELISA試劑盒異丁 ≥99%, FCC正壬 ≥95%, FCC, Kosher, FG酮洛芬

鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA試劑盒異戊 98%3,6-壬二烯 97%酮洛芬(標準品)


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