詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:中華絨螯蟹螺原體PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-02R6488
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品分類:水產(chǎn)養(yǎng)殖病害檢測系列(恒溫熒光法)
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
26S PSM ELISA Kit 大鼠26S蛋白體Multi-class antibodies: 48T
TRAIL 壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GJC2/Connexin 47 間隙連接蛋白47抗體 0.2ml
BGP/Gehrelin(Human brain-gut peptides) Elisa kit 人腦腸肽 96T
Neugrin 突觸生長相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
beta Amyloid 1-40 β淀粉樣肽(1-40)抗體 0.1ml
TRAIL 壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Human CA724 ELISA Kit 人標志物Multi-class antibodies: 48T
HGF 肝細胞生長因子抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MHC class I 組織相容性復合體1多肽抗體 0.1ml
PTP/PTPase/CD148(Human protein tyrosine phosphatase) ELISA Kit 人蛋白酪磷 96T
RIT1 RIT1蛋白抗體 0.2ml
CEP290 中心體蛋白290抗體 0.1ml
HGF 肝細胞生長因子抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit chicken IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗雞IgM 0.1ml
G alpha gust Gα gust抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAR1 (N-terminus) 雙鏈RNA腺苷脫氨基抗體(N端) 0.2ml
LYVE-1/FITC 熒光標記管內(nèi)皮透明質(zhì)受體抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗雞IgG 0.1ml
TBX2/T-box2/FITC 熒光標記新型抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
中華絨螯蟹螺原體PCR檢測試劑盒通用型羊布氏桿菌(Brucella abortus )基因檢測試劑盒20次大鼠趨化因子elisa檢測試劑盒
通用型羊關(guān)節(jié)炎腦炎病毒(Arthritis Encephalitis Virus)20次大鼠心肌營養(yǎng)1elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒大鼠P物質(zhì)elisa檢測試劑盒
通用型沙眼衣原體(Chlamydia)基因檢測試劑盒20次大鼠周期D1elisa檢測試劑盒
通用型羊口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease;FMD)20次大鼠高遷移率族蛋白1elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒大鼠血清總補體elisa檢測試劑盒
通用型羊約尼氏病/副結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium paratuberculosis /Johne’s disease)基因檢測試劑盒20次大鼠脫氫表雄酮硫酯elisa檢測試劑盒
通用型羊犬新孢子蟲(Neospora caninum)基因檢測試劑盒20次小鼠基質(zhì)金屬蛋白4elisa檢測試劑盒
通用型羊Q熱(Q Fever)基因檢測試劑盒20次小鼠Ⅰ型膠原elisa檢測試劑盒
通用型羊弓形體剛地弓形蟲(Toxotest;Toxoplasma gondii)基因檢測試劑盒20次大鼠低氧誘導因子1αelisa檢測試劑盒
通用型馬原蟲性腦脊髓炎(Equine Protozoa Myeloencephalitis)20次大鼠抗內(nèi)膜抗體elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒大鼠遲現(xiàn)抗原elisa檢測試劑盒
通用型馬皰疹病毒(Equine Herpes Virus Type 1)基因檢測試劑盒20次大鼠皮質(zhì)醇elisa檢測試劑盒
通用型馬萊姆癥嗜吞噬細胞無形體(Lyme and Anaplasma Phagocytophilum)基因檢測試劑盒20次大鼠肌球蛋白elisa檢測試劑盒
通用型馬傳染性貧血(Equine Infectious Anemia;EIA)20次小鼠8羥基脫氧鳥苷elisa檢測試劑盒