詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013593
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
KLK3/FITC 熒光標記激肽釋放3/舒血管3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SLK/Fyn/FITC 熒光標記酪蛋白激Fyn(同步原癌基因)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALOXE3 表皮型脂氧合3抗體(魚鱗病相關蛋白) 0.2ml
Rabbit human IgM/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗人IgM 0.1ml
GM2A 神經(jīng)鞘脂激活蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
SLK/Fyn/FITC 熒光標記酪蛋白激Fyn(同步原癌基因)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit 人熱休克蛋白糖蛋白96Multi-class antibodies: 48T
Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363) 磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體 0.1ml
EGF ELISA Kit 大鼠表皮生長因子 96T
PRKCDBP 蛋白激C delta結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
CKLFH1 趨化樣因子超家族成員1抗體 0.2ml
Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363) 磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Mouse human IgG(3D3)/PE-Cy3 PE-Cy3標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
GPX7 谷胱甘肽過氧化7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AT1R/AGTR1 血管緊張Ⅱ-1型受體抗體 0.1ml
HPV16-E6/E6 protein/FITC 熒光標記人類狀瘤病毒16抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho-MK1/MAPKK1(pSer298)/FITC 熒光標記抗磷化原活化蛋白激激1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒50次變形桿菌種屬: Proteus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: Kauffmann血清型 31 1培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
深海王祖農(nóng)菌種屬: Zunongwangia│profunda分離基物: 沉積物/柱狀樣(-2m)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株;培養(yǎng)基: 472生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
安卡紅曲種屬: Monascus│anka提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 醬油、腐乳培養(yǎng)基: 17生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
破傷風梭狀芽胞桿菌種屬: Clostridium│tetani提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0121生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
轉(zhuǎn)位因子蛋白(TSPO)ELISA試劑盒鋅標準溶液2.0mg/l,分析標準品,質(zhì)分析 三乙三氫氟鹽 97%十五氟辛(約5mmol)[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)位蛋白(TSN)ELISA試劑盒鋅 CP,99%疊氮化四丁基銨 95%十五氟辛,高等級[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)酮(TKT)ELISA試劑盒鋅粉 AR,99%十二基硫鈉 CP十三氟庚,高等級[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)ELISA試劑盒鋅 AR,99%十二基硫鈉 Ph. Eur,USP級,92%十一氟己,高等級[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒鋅粉 SP十二基硫鈉 AR,92.5-100.5%9,10-二甲氧基蒽-2-磺鈉鹽[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)ELISA試劑盒鋅粒 SP十二基硫鈉 97%,電泳敵草隆(標準品)
轉(zhuǎn)縮(TALDO1)ELISA試劑盒對氨基乙 98%十二基硫鈉 99.0%,超純級1,4-二標準溶液
轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)ELISA試劑盒甲酰 98%十二基硫鈉 ACS茜紅
轉(zhuǎn)錄銜接因子3(TADA3)ELISA試劑盒2,4-二氟溴 98%十二基硫鈉 分子生物學級,≥98.5% (GC)茜黃GG
轉(zhuǎn)錄銜接因子1(TADA1)ELISA試劑盒2--6-氟 98%十二基硫鈉 離子對色譜級,≥99.0% (GC)茜黃R
轉(zhuǎn)錄激活因子7(ATF7)ELISA試劑盒3,5-二氟甲 97%橙花 97%鋁試劑,玫紅三羧銨
轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)ELISA試劑盒3-磺酰 97%丁位辛內(nèi)酯 98%鋁試劑
轉(zhuǎn)錄激活因子5(ATF5)ELISA試劑盒基乙烯基砜 99%3- 99%性鉻藍K
轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)ELISA試劑盒對叔丁 95%3- ≥98%, FCC性品紅
轉(zhuǎn)錄激活因子1(ATF1)ELISA試劑盒甲基烯三氟乙酯 包含 100 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑,98%二甲基亞砜 for HPLC, ≥99.7%茜絡合指示劑(IND)
轉(zhuǎn)膠蛋白3(TAGLN3)ELISA試劑盒2,2,2-三氟乙 99.5%二氧化鈦 CP,98.0%茜絡合指示劑(高純級,98%)