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詳細(xì)介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR 試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013589
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit 人銜接蛋白活化因子1Multi-class antibodies： 48T
SLT/SLT-IIe/O139 豬腫(O139)菌體蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
BTA(Human Bladder tumor antigen) ELISA Kit 人膀胱抗原 96T
Nocturnin 分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體 0.2ml
BMX 非受體性蛋白酪激ETK抗體 0.1ml
SLT/SLT-IIe/O139 豬腫(O139)菌體蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Human Protein C ELISA Kit 人蛋白CMulti-class antibodies： 48T
PSMD9 蛋白調(diào)解因子9Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HCG alpha(4A8) 人絨毛膜促性腺α 亞基單抗 0.1ml
大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 96T
PRL 泌乳抗體 0.1ml
phospho-BNIP3 (Ser95) 磷化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體 0.1ml
PSMD9 蛋白調(diào)解因子9Multi-class antibodies： 0.2ml
Mouse human IgG(3D3)/FITC FITC標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
Glutaredoxin 5 谷氧還蛋白5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASZ1 錨定蛋白樣蛋白1抗體 0.2ml
HPV18-E6/E6 protein /FITC 熒光標(biāo)記人類狀瘤病毒18抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho c-kit/SCFR/CD117(pTyr936)FITC 熒光標(biāo)記抗磷化原癌基因c-kit抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR 試劑盒50次米根霉種屬: RhizopusoryzaeWentetPrinsen-Geerligs安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)乳培養(yǎng)基: 17生長條件: 28-30℃
鏈球菌種屬: Streptococcus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B培養(yǎng)基: CM0109生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌種屬: Yersinia│enterocolitica提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分群(型) 44 福氏培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
土壤桿菌種屬: Agrobacterium│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 182生長條件: 32℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
組蛋白脫乙?；?/span>5(HDAC5)ELISA試劑盒二甲酯 99%2-乙酰噻吩 99%四(色譜級)
組蛋白脫乙酰基4(HDAC4)ELISA試劑盒乙酰楊 99%2-溴噻吩 98%三乙(色譜級)
組蛋白脫乙?；?/span>3(HDAC3)ELISA試劑盒乙酰楊 用于植物培養(yǎng), ≥99.0%2,5-二溴噻吩 96%三（TFA）(色譜級)
組蛋白脫乙?；?/span>2(HDAC2)ELISA試劑盒楊甲酯 AR,99%3-甲基噻吩 98%四乙基氫氧化銨(10%的溶液)[離子對色譜級]
組蛋白脫乙?；?/span>11(HDAC11)ELISA試劑盒楊甲酯 CP,98%噻吩-2-甲 98%四丁基氫氧化銨(10%的溶液)[離子對色譜級]
組蛋白脫乙?；?/span>10(HDAC10)ELISA試劑盒楊甲酯 藥用級,99%噻吩-2-羧 99%四正丁基溴化銨[離子對色譜級]
組蛋白脫乙酰基1(HDAC1)ELISA試劑盒楊甲酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)2-噻吩乙酰 98%四正丁基化銨[離子對色譜級]
組蛋白H4(H4)ELISA試劑盒楊 AR,99.5%2-噻吩乙 98%四丁基氫銨 (0.5mol/L的溶液)[離子對色譜級]
組蛋白H3(H3)ELISA試劑盒楊 Ph. Eur., BP, USP, 99.5-100.5%噻吩 Standard for GC，>99.5%四丁基硫氫銨[離子對色譜級]
組蛋白H2B(H2B)ELISA試劑盒楊鈉 AR,99.5%噻吩 99%十二基基化[離子對色譜級]
組蛋白H2A(H2A)ELISA試劑盒楊鈉 CP,99.5%噻吩-2-乙 98%乙二丁基銨(約0.5mol/L的溶液)[離子對色譜級]
組蛋白H1(H1)ELISA試劑盒楊酰 99%3-噻吩甲 98%乙二基銨(約0.5mol/L的溶液)[離子對色譜級]
組-N-甲基轉(zhuǎn)移(HNMT)ELISA試劑盒楊酰 USP級對氨基乙酮 AR乙二戊基銨(約0.5mol/L溶液)[離子對色譜級]
組H4受體(HRH4)ELISA試劑盒楊酰 matrix substance for MALDI-MS三正丁基疊氮化錫 98%乙二己基銨(約0.5mol/L的溶液)[離子對色譜級]
組氨脫羧(HDC)ELISA試劑盒甲 重蒸餾, ≥99.5%2,4,6-三氮酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品1-磺鈉[離子對色譜級]
組氨豐富糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒α,α,α-三甲 99%對乙酰氨基磺酰疊氮 95%1-丁磺鈉[離子對色譜級]
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