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小麥內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管

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更新時間:2022-04-12 22:36:31瀏覽次數(shù):493

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 48T 0.2PCR管
貨號 FS-02R6687 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
小麥內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管正在出售的產(chǎn)品:即用型TB培養(yǎng)基規(guī)格:5個/包
SOB培養(yǎng)基(SOB Broth)規(guī)格:250g
即用型SOB培養(yǎng)基規(guī)格:5個/包

詳細(xì)介紹

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小麥內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管

48T   0.2PCR管

FS-02R6687

 

QQ截圖20201022162313.png 

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

實驗外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

MCP-3/CCL7/FITC 熒光標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體(大、小鼠)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 TIMP-3/FITC 熒光標(biāo)記金屬蛋白組織抑制因子-3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Acrosin 頂體前體蛋白抗體  0.2ml

Rabbit  Bov IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗IgG 0.1ml

GEMC1 染色體卷曲螺旋域包含蛋白1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Bov IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗IgG  0.1ml

 TIMP-3/FITC 熒光標(biāo)記金屬蛋白組織抑制因子-3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Irna(Human Immune RNA) ELISA Kit 人核糖核Multi-class antibodies: 48T

 phospho-FSCN1(Ser39) 磷化纖維束蛋白同源物1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Histone H3 (Di Methyl K4) 二甲基化組蛋白H3K4抗體  0.1ml

SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信號識別顆粒抗體 96T

recPEP 重組豬乙腦病毒結(jié)構(gòu)蛋白抗體 0.1ml

COMMD3 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 0.2ml

 phospho-FSCN1(Ser39) 磷化纖維束蛋白同源物1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rabbit  horse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml

GDAP2 神經(jīng)節(jié)苷脂誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh AKAP6 蛋白激A錨定蛋白6抗體  0.2ml

 LAIR-1/CD305/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞相關(guān)球蛋白樣受體1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Goat IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗羊IgM  2ml

 SP /FITC 熒光標(biāo)記P物質(zhì)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
小麥內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)elisa檢測試劑盒

大鼠鈣調(diào)(CAM)elisa檢測試劑盒

白三烯B4(LTB4)elisa檢測試劑盒

3磷肌醇(IP3)elisa檢測試劑盒

前列腺E2(PGE2)elisa檢測試劑盒

豚鼠丙酮脫氫磷(PDP)elisa檢測試劑盒

大鼠白介1受體II(IL-1R2)elisa檢測試劑盒

大鼠骨成型蛋白1(BMP-1)elisa檢測試劑盒

大鼠粒趨化蛋白2(GCP-2)elisa檢測試劑盒

花生烯(AA)elisa檢測試劑盒

豚鼠血栓前體蛋白(TpP)elisa檢測試劑盒

大鼠胰島樣生長因子1(IGF-1)elisa檢測試劑盒

大鼠雌二醇(E2)elisa檢測試劑盒

大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)elisa檢測試劑盒

血栓A2(TXA2)elisa檢測試劑盒
PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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