詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013420 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
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PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
LIR-8/CD85c/LILRB5/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞球蛋白樣受體8抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Survivin/PE 熒光PE標(biāo)記細(xì)胞凋亡抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor alpha 1腎上腺能受體抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.3ml
GRIK1 谷受體紅藻離子1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
Survivin/PE 熒光PE標(biāo)記細(xì)胞凋亡抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit 人載脂蛋白HMulti-class antibodies: 48T
MASP2 甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KATNA1/Katanin p60 A1 劍蛋白p60亞基A1抗體 0.2ml
Brucella Ab IgG(Human Brucella Antibody IgG) ELISA Kit 人布魯氏菌抗體IgG 96T
PYGM 肌肉糖原磷化抗體 0.2ml
CYP2D6 細(xì)胞色P450 2D6抗體 0.1ml
MASP2 甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse Kappa light chain/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
Galectin 12 半乳糖凝集12抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APAF1(CT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端) 0.1ml
IL-17F/IL-24/FITC 熒光標(biāo)記白介-17F抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
RAR- Beta /FITC 熒光標(biāo)記維甲受體-β抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒創(chuàng)傷弧菌種屬: Vibrio│vulnificus分離基物: 生物樣/人體血液提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 1、模式菌株 2、用于食品等方面的微生物檢測(cè),作為對(duì)照菌株。培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
球形賴氨芽孢桿菌種屬: Lysinibacillus│sphaericus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
煙曲霉種屬: Aspergillus fumigatus Fresenius提供形式: 凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: Czapek's 瓊脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。121℃,15min。傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長(zhǎng)條件: 25-28℃,好氧存儲(chǔ)條件: 2-8℃冷藏
腸侵襲性大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli EIEC分離基物: 腹瀉病例糞便標(biāo)本提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
天門冬氨轉(zhuǎn)氨/谷草轉(zhuǎn)氨(GOT/GPT)ELISA試劑盒乙酐 GR(易制品)(-)-乳乙酯 光致抗蝕劑級(jí),99%氫檳榔(進(jìn)口)
天門冬氨氨基轉(zhuǎn)移(AST)ELISA試劑盒反式 CP,97.00%L-乳 85-90%氫檳榔;(進(jìn)口)
特異性巨噬武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒脫氫乙鈉 99%DL-乳 ACS, ≥85%哌唑
套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒脫氫乙 98%L-乳鈉 AR,60%溶液唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖脂抗體(glycolipid)ELISA試劑盒乙酰乙乙酯 >99.0%(GC)L-乳鈉 98%子囊霉
糖原化同工MM(GP-MM)ELISA試劑盒乙酰乙甲酯 99%6-氨基吲唑 98%子囊霉(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖原化同工II(GP-II)ELISA試劑盒3-基吡啶 99%間羥基甲 98%阿扎那韋
糖原化同工BB(GP-BB)ELISA試劑盒鄰二甲 98%5-硝基吲唑 98%阿扎那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖原化(GP)ELISA試劑盒山梨 >99.0%(T)6-硝基吲唑 98%鹽托莫西汀
糖原合成激3(GSK-3)ELISA試劑盒2-基吡啶 98%硅鋁 AR,2000目鹽托莫西汀(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖原合成激(GSK)ELISA試劑盒3-甲基吡啶 99%上門維修費(fèi)用阿托伐醌,阿托喹酮
糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒4-基吡啶 98%2,2-偶氮二異丁 99%阿托伐醌,阿托喹酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖皮質(zhì)受體β(GR-β)ELISA試劑盒山梨 AR,99%氨基胍碳?xì)潲} 98.5%阿西替尼
糖皮質(zhì)受體α(GR-α)ELISA試劑盒山梨 CP,99%氨基胍碳?xì)潲} 分析標(biāo)準(zhǔn)品阿扎哌隆
糖脂酰肌(GPI)ELISA試劑盒山梨 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-巰基-1,2,4-三唑 97%鹽阿扎司瓊
糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒山梨標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/mL,基體:純聚乙烯,1000 分析標(biāo)準(zhǔn)品氮卓斯汀