詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013433 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
sPLA2 (Rat secreted phospholipase A2,sPLA2) ELISA Kit 大鼠分泌型磷脂A2Multi-class antibodies: 48T
Stra8 視黃激活基因8抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml
LDL-IC ELISA Kit 大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物 96T
NCKAP1L 造血蛋白1抗體 0.2ml
Phospho-Bad (Ser134) 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 0.1ml
Stra8 視黃激活基因8抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Human Cortisol ELISA Kit 人皮醇Multi-class antibodies: 48T
LRRC4 腦瘤相關(guān)基因抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KIZUNA/C20orf19 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體 0.2ml
Free-T3 ELISA Kit 大鼠游離狀腺原 96T
PTPRN 蛋白酪磷樣N前體蛋白抗體 0.2ml
phospho-CD244(Tyr271) 磷化CD244抗體 0.1ml
LRRC4 腦瘤相關(guān)基因抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GPRIN3 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APEX2 嘧啶核內(nèi)切2抗體 0.1ml
IL-17B/FITC 熒光標(biāo)記白介-17B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
PTTG/FITC 熒光標(biāo)記垂體轉(zhuǎn)化基因抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
放線(xiàn)菌屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒意大利青霉種屬: Penicilliumitalicum安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 15生長(zhǎng)條件: 25-26℃
淋病奈瑟菌種屬: Neisseriagonorrhoeae安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 質(zhì)控菌株;BBL的質(zhì)控菌株;性傳播的研究;Mediatesting培養(yǎng)基: 35生長(zhǎng)條件: 37℃,5%CO2
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
云南游動(dòng)放線(xiàn)菌種屬: Actinoplanes│yunnanensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0011生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)ELISA試劑盒甲芐酯 ≥99%, FCC肉桂乙酯 99%鹽羅(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG3)ELISA試劑盒乙芐酯 99%楊乙酯 99%瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)ELISA試劑盒乙芐酯 ≥99%, FCC, FG楊乙酯 ≥99%, FCC瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)ELISA試劑盒乙芐酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7% (GC菠蘿乙酯 99%西他列汀一
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)ELISA試劑盒甲丁酯 95%菠蘿乙酯 ≥99%, FCC, Kosher西他列汀一(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)特異性烯化(NSE)ELISA試劑盒甲丁酯 Standard for GC乙基香蘭 98%壯觀霉,鹽大觀霉
神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒仲丁 99%母菊酯 98%壯觀霉(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒乳丁酯 98%丁香酚 99%鹽坦洛新/鹽坦索羅辛
神經(jīng)絲蛋白M(NF-M)ELISA試劑盒正丁 ≥99.9%, FCC桉葉油 99%紅霉酮(特利霉)
神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)ELISA試劑盒楊丁酯 99%桉葉油 萜GC標(biāo)準(zhǔn)品 ,>99.5% (GC)替米沙坦
神經(jīng)絲蛋白H(NF-H)ELISA試劑盒乙丁酯 ≥99%, FCC桉葉油 ≥99%, FCC替米沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒甲縮 98%4-乙基愈創(chuàng)木酚 99%
神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體(NGFR)ELISA試劑盒甲縮 98%, Kosher4-乙基愈創(chuàng)木酚 ≥98%, FCC, FG(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)ELISA試劑盒香茅 98%乙基麥芽酚 99%噻托溴銨一合物
神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒香茅 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.0% (GC)乙基麥芽酚 99%, FCC, FG鹽酮
神經(jīng)母瘤抗體(NB-Ab)ELISA試劑盒丁香油 CP乙酰乙酯 99%鹽酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。