詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:桃拉綜合癥病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013416
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Ephrin B (phospho Tyr298) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化Ephrin B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SV2A/FITC 熒光標記突觸泡蛋白2A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
膜粘連蛋白-2抗體 Annexin II 0.2ml
Mouse human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗人IgG 0.1ml
GALNS 軟骨裂解抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PRMT5 組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移5抗體 0.2ml
SV2A/FITC 熒光標記突觸泡蛋白2A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
CT(Human Chlamydia trachomatis) ELISA Kit 人沙眼衣原體Multi-class antibodies: 48T
Phospho-IRAK1 (Ser376) 磷化白介-1受體相關激1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LIFR/CD118 白血病抑制因子受體抗體 0.1ml
HIV(Human immunodeficiency virus antibody) ELISA Kit 人抗人類缺陷病毒抗體 96T
QRFP 神經(jīng)肽QRFP抗體 0.2ml
C12ORF24 12號染色體開放閱讀框24抗體 0.2ml
Phospho-IRAK1 (Ser376) 磷化白介-1受體相關激1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit mouse Kappa light chain/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GPR115 G蛋白偶聯(lián)受體115抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANTXR2 炭疽受體2抗體 0.2ml
IL-20R Alpha/IL20RA/FITC 熒光標記白介20受體α鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗人IgM 0.1ml
Phospho-RasGRF1 (Ser916)/FITC 熒光標記磷化Ras特異性鳥核苷釋放因子1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
桃拉綜合癥病毒染料法熒光定量PCR試劑盒O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae O1提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: O1/eltor 稻葉(Inaba)培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
釀膿鏈球菌種屬: Streptococcus│pyogenes分離基物: Scarlet fever提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 221生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
羊布氏菌種屬: Brucella│melitensis提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 獸用死菌苗,強毒株培養(yǎng)基: CM0112生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
卷枝毛霉lusitanicus變型種屬: Mucor│circinelloides f. lusitanicus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: Type strain of M. jauchae培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
維生K1(VK1)ELISA試劑盒1,2,3- 91%3,5-二叔丁基溴 99%鹽克林霉
維生H(VH)ELISA試劑盒1,2,3- 分析標準品O-[(乙氧基羰基)]-N,N,N',N'-四甲基硫尿四氟鹽 98%鹽克林霉(標準品)
維生E(VE)ELISA試劑盒(+)-δ-酚 90%1-乙基-(3-二甲基氨基基)碳二亞鹽鹽 98.5% 鹽維拉帕米
維生D受體(VD R)ELISA試劑盒(+)-δ-酚 分析標準品2-乙氧基-1-乙氧碳?;?1,2-二氫喹啉 99%鹽維拉帕米(標準品)
維生D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒3-巰基-1,2- Matrix for FAB-MS and liquid SIMS, ≥98.5%2-氟-1,3-二甲基化咪唑翁六氟酯 97%霉酚; 麥考酚;MPA
維生D3(VD3)ELISA試劑盒三酯 99%乙甲脒 99%霉酚; 麥考酚(標準品)
維生D2(VD2)ELISA試劑盒甲基托布津 分析標準品四甲基氟代脲六氟酯 98%阿莫西林/羥氨芐青霉
維生D(VD)ELISA試劑盒碲 98%9-芴甲基-N-琥珀酰亞基碳酯 98%阿莫西林(標準品)
維生C(VC)ELISA試劑盒硫代嗎啉 98%芴甲氧羰酰 98%非諾貝特
維生B6(VB6)ELISA試劑盒綠草定 分析標準品芴甲氧羰酰 99%非諾貝特(標準品)
維生B3(VB3)ELISA試劑盒2-乙酰檸檬三乙酯 99%4-(羥基)氧基乙 98%磺舒
維生B2(VB2)ELISA試劑盒三(硅基)硅 90%并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟酯 99%磺舒(標準品)
維生B12(VB12)ELISA試劑盒溴化 99%1-羥基-并-三氮唑(無) 99%諾氟沙星
維生B1(VB1)ELISA試劑盒 99.99%(劇品)3-羥基-1,2,3-并三-4(3H)-酮 98%諾氟沙星(標準品)
維生A(VA)ELISA試劑盒質(zhì)標樣 分析標準品(劇品)2-(7-偶氮并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟酯 99%諾氟沙星鹽鹽
微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒(+)-γ-維生E 96%1-羥基-7-偶氮并三氮唑 99%諾氟沙星鹽鹽(標準品)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。