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EB病毒感染的人外周淋巴細胞;JVM-2品牌

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更新時間:2018-05-18 14:53:38瀏覽次數(shù):406

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 詳見說明書
貨號 FS-ATCC-0103 主要用途 科研
EB病毒感染的人外周淋巴細胞;JVM-2品牌公司所提供的原代細胞均需經(jīng)過細胞類型特異性標記物、細胞形態(tài)學等檢測,保證細胞純度在90%以上;同時也需經(jīng)過微生物檢測,保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌。本公司竭誠為廣大科研工作者服務!如需訂購,請!

詳細介紹

細胞名稱  EB病毒感染的人外周淋巴細胞;JVM-2品牌
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

生長特性 懸浮生長

特征特性 該細胞是 J.V.Melo從一位63歲患有套細胞淋巴瘤白人女性外周血中分離建立的,經(jīng)EBV介導獲得永生化,該細胞表達p16和細胞周期蛋白D2,低水平表達細胞周期蛋白D1。 

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 

傳代方法 1:

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C10

凍存條件 70% growth medium; 20% FBS; 10% DMSO 

支原體檢測 陰性 

STR STR鑒定

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

EB病毒感染的人外周淋巴細胞;JVM-2品牌操作流程:

※主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡),co2孵箱。
※細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
  ?細胞的復蘇培養(yǎng):從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,同時不斷搖動使之迅速融化,然后用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
  ?細胞傳代:原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
  ?細胞形態(tài)的觀察:在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
  ?生長曲線:取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
  ?細胞的貼壁率:指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
   ?細胞的計數(shù):常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。

本公司專業(yè)代理ATCC細胞,提供售前售后服務,若要獲取詳細的說明書或價格信息,請。

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